Iṣelọpọ hisulini iṣelọpọ

Insulini - homonu kan ti iṣan ti o ṣatunṣe | iṣelọpọ agbara ati mimu mimu ipele deede ti cazdpaninu ẹjẹ. Aini homonu yii ninu ara nyorisi.) Si ọkan ninu awọn aarun to ṣe pataki julọ - àtọgbẹ, eyiti, bi idi ti iku, wa ni ipo kẹta lẹhin awọn arun inu ọkan ati ẹjẹ ati akàn. Insulini jẹ globule kekere | amuaradagba ti o ni awọn iṣẹku amino acid 51 ati ti awọn ẹwọn polypeptide meji ti o sopọ mọ pọ nipasẹ awọn afara meji disulfide. O jẹ adapọ ni irisi iṣọkan ọmọ inu oyun-ara, preproinsulin, ti o ni koi peptide ami ifihan kan (awọn iṣẹku amino acid 23) ati ọna asopọ 35 kan asopọ peptide (C-peptide). Nigbati a ba yọ peptide ami naa, proinsulin lati awọn iṣẹku amino acid 86 ni a ṣẹda ninu sẹẹli, ninu eyiti awọn ẹwọn A ati B ti hisulini ti sopọC-neitweed kan, eyiti o pese fun wọn pẹlu iṣalaye ti o yẹ ni $ 3 lori iwe adehun imukuro. Lẹhin piparun proteolytic ti C peptide, a ti ṣẹda hisulini.

Orisirisi awọn àtọgbẹ ti mọ. Fọọmu ti o nira julọ, fun itọju eyiti alaisan naa nilo insulini (fọọmu igbẹkẹle-insulin ti o ni arun na), ni a fa nipasẹ iku yiyan awọn sẹẹli ti o papọ homonu yii (awọn sẹẹli ti awọn erekusu ti Langerhans ninu ẹya-ara). Fọọmu ti alakan mellitus, fun eyiti itọju pẹlu insulini ko nilo, jẹ eyiti o wọpọ julọ, o le ṣakoso pẹlu iranlọwọ ti awọn ounjẹ ti o yẹ ati tun:> ma. Ni deede, oronro ti malu ati maalu ko lo ninu eran ati ile-iṣẹ canning ati pe a gbe sinu awọn ọkọ oju-omi ti o ni tutu fun awọn ile-iṣẹ elegbogi nibiti a ti gbe ifa homonu jade. Lati gba 100 g cr! Hisulini Thallic nilo 800-1000 kg ti ifunni

Ṣiṣẹpọ awọn ẹwọn mejeeji ati asopọ wọn pẹlu awọn asopọ disudfid lati gba hisulini ni a ti gbe ni ọdun 1963 ati 1965. awọn ẹgbẹ iwadii mẹta ni AMẸRIKA, China ati Germany. Ni ọdun 1980, ile-iṣẹ Danish Novo Industri ṣe agbekalẹ ọna kan fun iyipada iyipada hisulini ẹlẹdẹ si hisulini eniyan nipa rirọpo iṣẹku ọgbọn ti alanini ni pq B pẹlu iṣẹku threonine. Iṣeduro mejeeji ko yatọ ni iṣẹ ṣiṣe ati iye akoko iṣe.

Iṣẹ lori ẹrọ ṣiṣe-jiini ti hisulini bẹrẹ ni ọdun 20 sẹyin. Ni ọdun 1978, ifiranṣẹ kan han nipa iṣelọpọ igara ti Escherichia coli ti n gbe proinsulin eku (AMẸRIKA). Ni ọdun kanna, awọn ẹwọn hisulini ti ara ẹni kọọkan ni a ṣepọ nipasẹ ikosile awọn jiini-jiini ti wọn wa ninu awọn sẹẹli.E.coli(Fig. 5.11). Ọkọọkan awọn jiini ti kojọpọ jẹ ti tunṣe si 3'-opin ti ọpọlọ enzymu (3-galactosidase ati ṣafihan sinu pilasima vector(pBR322).Awọn sẹẹliE.coliyipada pẹlu iru awọn pilasima idapọmọra, awọn ọlọjẹ arabara (chimeric) ni a ṣe agbejade ti o jẹ apakan ti p-galactosidase ati pe tabi peptide insulin ti A tabi B ti a so mọ pẹlu rẹ nipasẹ iṣẹku methionine. Nigbati o ba n ṣiṣẹ amuaradagba chimeric pẹlu cyanogen bromide, a ti tu peptide silẹ. Bibẹẹkọ, pipade ti awọn afara disulfide laarin awọn ẹwọn insulini ti o ṣoro nira.

Ni ọdun 1981, analogue pro-insulin, mini-C-pro-insulin, ti a ṣepọ, ninu eyiti a rọpo C-peptide 35-ẹgbẹ C-peptide nipasẹ apakan ti amino acids mẹfa: arg-arg-gly-ser-lys-arg ati ifihan rẹ ti han niE.coli.

Ni ọdun 1980, W. Gilbert ati awọn alabaṣiṣẹpọ rẹ ya sọtọ insulini mRNA lati inu eku kan ti o jẹ P-sẹẹli ati o gba CDNA lati ọdọ rẹ nipa lilo transcriptase. Abajade cDNA ti o wa sinu fi si plasmidpBR322E.colini agbedemeji jiini penisillinase. Pilasima ti o ṣokunkun jẹ alaye lori be ti proinsulin.Gẹgẹbi abajade ti itumọ MRNA, amuaradagba arabara kan ti a ṣepọ ninu awọn sẹẹli ti o ni penicillinase ati awọn ilana proinsulin, eyiti a ti kọsẹ pẹlu trypsin lati iru amuaradagba yii.

Ni ọdun 1978, awọn oṣiṣẹ ti Institute of Bioorganic Chemistry labẹ abojuto Acad. A. Ovchinnikov, awọn jiini eleto meji ti o ṣe ilana iṣelọpọ ti neuropeptides ni sise:leucine- enkephalin ati bradykinin.Awọn leucine enkephalin pupọ ti ni awọn “alaleke” meji pari:

Abajade ẹbun sintetiki ti o wa ni a fi sinu papọ pẹlu ida kan ti DNA adayeba ti o ni olugbeleke ati apakan proximal ti ẹbun amuaradagba fun E. coli P-galactosidaseE.colisi pilasima

Gba insulin, awọn ọna ti ina-jiini, Imọ-ẹrọ Oniruuru-iṣẹ

1. Ipilẹ ati awọn iṣẹ ti hisulini 5

1.1. Awọn be ti a npe ni hisulini 5

1,2. Idi pataki ti hisulini ti insulin 7

1.3. Insulin Biosynthesis 8

2. Jiini hisulini isọdi iṣe 10

2,1. Lilo awọn ọna ti ẹrọ jiini fun kolaginni ti awọn oogun 10

2,2. Awọn ọna Imọ-Jiini 11

2,3. Iṣelọpọ hisulini iṣelọpọ 14

Yato si lati ọrọ

Pẹlupẹlu, mejeeji awọn paati wọnyi le wa ni nigbakannaa ninu akojọpọ ti amuaradagba arabara. Ni afikun, nigba ṣiṣẹda awọn ọlọjẹ arabara, opo ti multidimensionality le ṣee lo - niwaju ọpọlọpọ awọn adakọ ti polypeptide fojusi ninu amuaradagba arabara, eyiti o le mu alekun ga julọ ti ọja afojusun.

Ni Ilu Gẹẹsi, awọn eepo mejeeji ti hisulini eniyan ni a ṣepọ nipa lilo E. coli, ti sopọ si sẹẹli ti homonu kan ti nṣiṣe lọwọ biologically. Ni ibere fun ẹya ara-ara ti kii ṣe ẹya ara lati ṣe iṣelọpọ awọn sẹẹli hisulini lori awọn ribosomes rẹ, o jẹ dandan lati pese pẹlu eto pataki, eyini ni, ṣafihan jiini homonu si rẹ.

O gba hisulini ti o tunpo ni Ile-ẹkọ ti Ile ẹkọ ijinlẹ ti Russian ti sáyẹnsì nipa lilo awọn igara ti ipilẹṣẹ atabasi ti E. coli. A ti sọ amuaradagba ẹya ara ẹni sẹyin tẹlẹ lati ara ẹrọ ti o dagba tan, ti a fihan ninu awọn titobi

40. ti amuaradagba cellular lapapọ ti o ni awọn preproinsulin.

Iyipada rẹ si hisulini ninu fitiro ni a gbejade ni ọkọọkan kanna bi ni vivo - polypeptide oludari ti wa ni mimọ, preproinsulin ti yipada si hisulini nipasẹ awọn ipo ti oxitoative sulfitolysis, atẹle nipa pipade idinku ti awọn iwe adehun disulfide mẹta ati ipinya enzymatic ti abuda C-peptide. Lẹhin onka paṣipaarọ ti ion, gel ati awọn imulẹ chromatographic HPLC, isọdọmọ eniyan ti mimọ giga ati iṣẹ ṣiṣe ayebaye.

Lati gba hisulini, a lo okun pẹlu ilana ipotẹ nucleotide ti a fi sinu pilasima n ṣalaye amuaradagba arabara ti o ni proinsulin laini kan ati ida kan ti amuaradagba staphylococcus aureus A ti so mọ N-terminus rẹ nipasẹ ipinku methionine 8, 9, 10.

Ogbin ti awọn baamu aye ti o kun fun awọn sẹẹli ti igbin adaṣe pese ipilẹṣẹ iṣelọpọ ti amuaradagba arabara, ipinya ati iyipada ọna atẹle eyiti eyiti inu tube yorisi insulin.

Ọna miiran tun ṣee ṣe: gbigba ninu eto eto iworo ti ifihan ti amuaradagba atunlo ti o wa pẹlu proinsulin eniyan ati iru polyhistidine ti o so mọ pẹlu ifaagun methionine. O ti ya sọtọ ni lilo chromatography ti chelate lori awọn ọwọn pẹlu Ni-agarose ati cleavage bromine.

Amuaradagba ti o ya sọtọ jẹ S-sulfonated. Ṣiṣayẹwo ati itupalẹ ibi-iwoye ti proinsulin ti a ti sọ di mimọ nipasẹ chromatography paṣipaarọ paṣipaarọ lori resini paṣipaarọ anion ati RP (alakoso iyipada) chromatografi omi iṣẹ ṣiṣe giga ti o ṣafihan niwaju awọn afara disulfide ti o ni ibamu si awọn afara disulfide ti proinsulin eniyan abinibi.

Laipẹ, a ti san akiyesi sunmọ si irọrun ilana naa fun iṣelọpọ insulini atunlo nipasẹ imọ-ẹrọ jiini.Nitorinaa, fun apẹẹrẹ, o le gba amuaradagba ti o wa pẹlu proinsulin ti o so pọ si N-terminus nipasẹ idajẹ lysine ti peptide oludari interleukin

2. Awọn amuaradagba ti wa ni afihan daradara ati ti agbegbe ni awọn ara ifisi. Lẹhin ipinya, amuaradagba lati ṣe iṣelọpọ insulin ati C-peptide ti wa ni mimọ pẹlu trypsin 5, 8, 10.

Iṣeduro iyọrisi ati C-peptide jẹ mimọ nipasẹ RP-HPLC. Pupọ pupọ nigbati ṣiṣẹda awọn ẹya ara ẹrọ ni ipin ti awọn ọpọ eniyan ti amuaradagba ti ngbe ati polypeptide afojusun naa.

C-peptides pẹlu iranlọwọ ti awọn alafo amino acid ti o gbe aaye ihamọ ihamọ Sfi I ati awọn iṣẹku arginine meji ni ibẹrẹ ati ni opin alaṣẹ kan fun tito nkan lẹsẹsẹ amuaradagba atẹle ti o ni asopọ pọ gẹgẹ bi ilana ori-iru.

HPLC ti awọn ọja fifa fihan pe fifa ti C-peptide tẹsiwaju ni pipọ, ati pe eyi ngbanilaaye lilo awọn jiini-jiini pupọ lati ṣe agbekalẹ polypeptides afojusun lori iwọn ile-iṣẹ.

Ipari

Iyalẹnu, ati ni ọpọlọpọ awọn ọran, ọna nikan lati ṣetọju igbesi aye ati agbara iṣẹ ti awọn alaisan ti o ni àtọgbẹ mellitus ni lati ọjọ, insulin.

Ṣaaju ki o to gbigba ati ṣafihan insulin sinu adaṣe isẹgun, a nireti abajade ti o sanra fun ọdun kan tabi meji lati ibẹrẹ ti arun iru awọn alaisan alakan, ni titọlo lilo awọn ounjẹ ti o ni ailera julọ.

Awọn alaisan alakangbẹ I nilo awọn itọju atunṣe rirọ gigun pẹlu awọn igbaradi insulini. Idaduro ti iṣakoso deede ti hisulini fun idi kan tabi omiiran yori si idagbasoke iyara ti awọn ilolu ati iku iyara ti alaisan.

Lọwọlọwọ, itankalẹ ti àtọgbẹ wa ni ipo kẹta lẹhin awọn arun ti eto inu ọkan ati ẹjẹ ti eegun. Ilọ ti àtọgbẹ laarin awọn agbalagba, ni ibamu si Igbimọ Ilera ti World, ni ọpọlọpọ awọn ẹkun ni agbaye jẹ 2-5% ati tan lati mu gbogbo eniyan pọ si

Awọn ọdun 1. ti nọmba awọn alaisan fẹrẹ ilọpo meji. Nọmba ti awọn alaisan ti o gbẹkẹle insulin, laibikita ilọsiwaju ti o han ni aaye ti ilera, n pọ si ni gbogbo ọdun, ati lọwọlọwọ ni Russia nikan ni o fẹrẹ to eniyan miliọnu meji.

Awọn ọna ti o ni ileri pupọ julọ fun iṣelọpọ insulin jẹ awọn ọna imọ-ẹrọ jiini. Iṣeduro imọ-ẹrọ atilẹba ti wa ni gba nipasẹ gbigbe awọn ẹwọn lọtọ A ati B ni lilo awọn oriṣiriṣi onirin iṣelọpọ ati kika sẹẹli, atẹle nipa iyasọtọ ti isoforms, ati iṣelọpọ ti proinsulin ni awọn sẹẹli E. Coli pẹlu isọdi rẹ pẹlu trypsin ati carboxypeptidase ati iṣelọpọ ti hisulini abinibi.

Idagbasoke ti awọn igbaradi hisulini ti abinibi ti ara eniyan ṣii awọn aye tuntun fun ṣiṣapẹrẹ ọpọlọpọ awọn iṣoro ti diabetology ti Ilu Rọsia lati le gba ẹmi awọn miliọnu eniyan lọwọ pẹlu alatọ.

Litireso

Balabolkin M.I., Klebanova E.M., Kreminskaya V.M. Àtọgbẹ mellitus: awọn abala ti igbalode ti iwadii ati itọju / Dokita, ed. G.L. Vyshkovsky.-2005.- M.: RLS-2005, 2004.- 960 p.

Gavrikov, A.V. Pipe ti iṣelọpọ imọ-ẹrọ ti awọn nkan ti awọn interferons eniyan ti o ṣoki: dis. ... abẹla. biol. Sáyẹnsì - M, 2003

Atilẹba injinia ti ara eniyan. Alekun ṣiṣe ti iyapa chromatographic nipa lilo ipilẹ-ọna-jijẹ. / Romanchikov A.B., Yakimov S.A., Klyushnichenko V.E., Arutunyan A.M., Wulfson A.N. // Chemistry Bioorganic, 1997 - 23, NỌ. 2

Glick B., Pasternak J. Iṣakoso ti lilo awọn ọna imọ-ẹrọ nipa igbesi aye // B. Glick, J. Parsnip / Molecular Biotechnology = Ilọsiwaju Onimọ-jinlẹ. - M.: Mir, 2002 .-- S. 517-532. - 589 p.

Glick B., Pasternak J. Ilo-ara Onigbagbọ. Ilana ati ohun elo. M: M, 2002.

Davis R., Botstein D, Awọn ọna Roth J. ti iṣẹ-jiini. Jiini ti awọn kokoro arun // R. Davis, D. Botstein, J. Roth / Per. lati Gẹẹsi. — M.: Mi. - 1984 - 176 p.

Ermishin A.P.Awọn ohun ara Jiini Ti yipada: Adaparọ ati Otitọ / A.P. Ermishin // Mn.: Tekhnalogaliya.- 2004. - 118 p.

Awọn ipilẹ ti Ẹkọ nipa Oogun Onilẹ-ede: Iwe ẹkọ / TP Prischep, V.S. Chuchalin, K.L. Zaykov, L.K. Mikhaleva. - Rostov-on-Don.: Phoenix, Tomsk: NTL Publishing House, 2006.

Patrushev L.I. Awọn ọna jiini. // L.I. Patrushev / M.: Nauka.- 2004.

Romanchikov, A.B. Atilẹba injinia ti ara eniyan. Alekun ṣiṣe ti iyapa chromatographic nipa lilo ipilẹ-ọna-jijẹ. / A.B. Romanchikov ati awọn miiran.

// Chemistry Bioorganic. 1997. Bẹẹkọ 2. p. 23

Awọn ipilẹṣẹ ti Ẹrọ-Jiini // V.N. Rybchin / 2nd ed., Atunwo. ati fikun: Iwe ẹkọ fun awọn ile-ẹkọ giga. SPb.: Ile gbigbe ti SPbSTU. - 2002 .-- 522 s.

Schelkunov S. N. Imọ-jiini Jiini // Schelkunov S. N. / Novosibirsk: Sib. univ. Ile ti Te.

Schelkunov, S.N. Imọ ẹrọ jiini: iwe ẹkọ. iyọọda. - 2nd, ed., Rev. ati fikun. - Novosibirsk: Sib. univ. Ile Atẹjade, 2004 .-- 496 p.

1. Ipo ti awọn iwe adehun disinu ni sẹẹli insulin.

2. Eto ti awọn iṣẹku amino acid ninu sẹẹli insulin

Ipa ti insulini lori awọn enzymu ti ase ijẹ-ara

Ẹdọ Ẹdọ Fi ṣiṣẹ Mii ẹran ara ṣiṣẹ 1. Phosphodiesterase 1. Phosphodiesterase 1. LP-lipase

4. Pyruvate eka idapọju

4. Pyruvate eka idapọju

5. Phosphatase glycogen synthase ati glycogen phosphorylase

5. Glycogen synthase phosphatase b. Acetyl-CoA-carboxylase Induction 1. Glucokinase 1. Glyceraldehyde fosifeti dehydrogenase

6. Glukosi-6-phosphate dehydrogenase Ifiweranṣẹ Phosphoenolpyruvate carboxykinase

Ọpọtọ. 3 Ero ti hisulini biosynthesis ninu awọn sẹẹli-ẹyin ti awọn erekusu ti Langerhans. ER - endoplasmic reticulum. 1 - dida ti peptide ami ifihan, 2 - kolaginni ti preproinsulin, 3 - fifọ ti peptide ami ifihan, 4 - gbigbe ti proinsulin si ohun elo Golgi, 5 - iyipada ti proinsulin sinu hisulini ati C-peptide ati ifisi insulin ati C-peptide sinu awọn aṣiri oye, 6 - aṣiri insulin ati C peptide.

4. Generaltò Gbogbogbo fun iṣelọpọ ti hisulini lati ọdọ awọn ti o ṣaju rẹ

Ọpọtọ. 5 Oofa ti hisulini nipa dida awọn ẹwọn meji yiyatọ

Ọna ti gba insulin ti ẹrọ atunse eniyan

Kiikan naa ni ibatan si aaye ti imọ-ẹrọ imọ-jinlẹ, ati ni pataki si iṣelọpọ ti insulin eniyan ti a fi eto ṣe fun iṣelọpọ awọn oogun ti a lo ninu itọju ti àtọgbẹ mellitus.

Ọna naa ni a ṣe nipasẹ dida ara iru iṣelọpọ ti amuaradagba arabara ti o ni proinsulin eniyan, Escherichia coli BL21 / pPINS07 (BL07) tabi Escherichia coli JM109 / pPINS07, idalọwọ awọn sẹẹli nipasẹ pipin, pipin awọn ara ifisi ti o ni amuaradagba arabara.

Nigbamii, fifọ alakoko ti awọn ara ifisi, itu nigbakanna ti amuaradagba ati imupadabọ awọn iwe adehun disipide ni ifipamọ pẹlu 5-10 mM dithiothreitol ati 1 mM EDTA ni a ti gbejade, itusilẹ ati isọdọtun ti amuaradagba ifunmọ ifunni nipa chromatography paṣipaarọ paṣipaarọ paṣipaarọ.

Ṣiṣewe ti amuaradagba arabara ni a ṣe nipasẹ iṣọn-ikepọ apapọ ti trypsin ati carboxypeptidase B ni ipin iwuwo ti amuaradagba arabara, trypsin ati carboxypeptidase B 4000: 0.6: 0.9.

Isọmọ hisulini ni a ṣe nipasẹ hydrophobic chromatography tabi yiyipada akoko iṣẹ ṣiṣe giga chromatography atẹle nipa iyọkuro jeli, ati ipinya ti hisulini nipasẹ igbe kirisita ni niwaju awọn iyọ sinkii. Kiikan gba lati dinku ilana ti gbigba isọdọmọ eniyan ti abinibi ati mu iṣelọpọ rẹ pọ si.

Kiikan naa ni ibatan si aaye ti imọ-ẹrọ imọ-jinlẹ, ati ni pataki si iṣelọpọ ti insulin eniyan ti a fi eto ṣe fun iṣelọpọ awọn oogun ti a lo ninu itọju ti àtọgbẹ mellitus.

Gbigba awọn aṣeyọri akọkọ ti diabetology ti igbalode ati awọn iṣeduro ti Igbimọ Ilera ti Agbaye, awọn orilẹ-ede Europe ni ọdun 2001 pari iyipada si lilo insulini eniyan. Ni iyi yii, idagbasoke awọn ọna fun iṣelọpọ insulin nipa lilo awọn ọna ti imọ-ẹrọ atunṣe-DNA jẹ iṣẹ-ṣiṣe ti o dekun.

Ọna ti a mọ fun mimu iṣọn-injinia ti eniyan ni abinibi, eyiti o ni jijẹ igara iṣelọpọ E. Coli ti n ṣafihan proinsulin, ti o ni ọkọọkan awọn ipo asopọ IgG sintetiki meji ti amuaradagba staphylococcal A.

Ọna naa ni iparun awọn sẹẹli kokoro, gbigba ifisi Taurus ti o ni proinsulin, tito ifisi Taurus, oxidative sulfitolysis ti proinsulin, isọdọtun rẹ, isọmọ ti amuaradagba atunlo nipasẹ chromatography affinity, fifọ ti Proinsulin pẹlu awọn enzymu proteolytic (trypsin ati iṣapẹẹrẹ atẹsẹ wiwọn pipe ati mimọ pipe-mimọ pẹlu isotọ gaasi mimọ) pẹlu mimọ isotọ pipe-mimọ pẹlu mimọ isotọ gaasi mimọ ati mimọ pipe-mimọ pipe ati mimọ isotọ gaasi mimọ ati mimọ pipe isotọ pẹlu mimọ isotọ pipe-mimọ pẹlu mimọ isotọ pipe-mimọ pẹlu mimọ isotọ to gaju mimọ pẹlu mimọ isotọ gaasi mimọ ati mimọ afọwọse pipe pẹlu iwa mimọ mimọ pipe chromatography (Nilson J., Jonasson P., Samuelsson E., Stahl S., Uhlen M. "Iṣelọpọ iṣọpọ ti insulin eniyan ati C-peptide rẹ", Iwe akosile ti imọ-ẹrọ, 1996, v. 48, p. 241-250) .

Awọn aila-nfani ti ọna yii ni idiyele giga ti ọja ati lilo ninu iṣelọpọ ohun elo aṣeduro insulin, eyiti o le wa ninu ọja ti a pinnu.

Ọna ti a mọ ti iṣelọpọ iṣelọpọ eniyan ti abinibi, eyiti o ni jijẹ awọn sẹẹli ti awọn igara iṣelọpọ E.

Coli DN5 a / pVK100, pa awọn sẹẹli kokoro nipa iparun ultrasonic, awọn ara ifisi iyasọtọ ti o ni amuaradagba arabara lati awọn eekanna omi nipasẹ centrifugation, tu awọn ara ifisi ni apo iṣu kan ti o ni 8 M urea, 1 mM dithiothreitol, 0.1 M Tris-HCl, pH 8.0, fun awọn wakati 12-16.

Awọn abirun ti ko ni agbara yọ kuro nipasẹ centrifugation, lẹhin eyi ni ifọkansi ti dithiothreitol pọ si 10 mM ati awọn iwe adehun disulfide ti wa ni pada ni 37 ° C fun wakati 1. A ti fo ojutu naa ni awọn akoko 5 pẹlu omi tutu, tunṣe si pH 4.5 ati ṣibi fun wakati 2 ni 4 ° C lati ṣe agbekalẹ kan.

Iṣeduro ti o ni amuaradagba arabara ni a ya sọtọ nipasẹ centrifugation ati tun ṣe, ni tituka ni kiakia ni omi tutu ni pH ti 10-12, lẹhin eyi ti o ti fomi pẹlu 10 gM glycine buffer, pH 10.8, ati pe o pa ni 4 ° C ni alẹ. Lẹhin ultrafiltration, ojutu naa ni a tẹriba filtration jeli lori iwe Sephadex G-50 ati fifọ pẹlu ifipamọ glycine 10 mM.

Awọn ida ti o ni awọn amuaradagba kojọpọ ni a gba, ultrafiltered, ati di-didọ. Awọn amuaradagba akojọpọ idapọ ti wa ni tituka ni 0.08 M Tris-HCl ifipamọ, pH 7.5, si ifọkansi ti 10 miligiramu / milimita ati fifọ ni nigbakannaa pẹlu trypsin ati carboxypeptidase B (ipin ti carboxypeptidase B: trypsin: amuaradagba eeru 0.3: 1: 10) ni 37 ° C fun ọgbọn išẹju 30.

Lẹhinna ṣafikun isopropanol si 40%. Iparapọ naa jẹ chromatographed lori iwe-iwe DEAE-Sephadex A-25 ati fifọ pẹlu 0.05 M Tris-HCl ifipamọ, pH 7.5 pẹlu 40% isopropanol pẹlu iyọdawọn ila ti iṣuu soda iṣuu lati 0 si 0.1 m Lẹhin yiyọ ti isopropanol, ifọkansi ti iṣuu soda iṣuu pọ si 25%, yi pH naa si 2.0 ki o gba iṣaro hisulini.

(Chen J.-Q., Zhang H.-T., Hu M.-N., Tang J.-G., “Iṣelọpọ ti hisulini eniyan ni eto E. Coli pẹlu proinsulin met-lys-proinsulin eniyan ṣaaju “Ifọwọsi Biokemisitiri ati Imọ-ẹrọ, 1995, v. 55, p. 5-15).

Awọn aila-nfani ti ọna yii pẹlu lilo filtration jeli ni awọn ipele ibẹrẹ, eyiti o nilo iye nla ti sorbent ati nọmba nla ti awọn ensaemusi ti a lo ninu isọdi ti amuaradagba arabara.

Ọna ti a mọ fun ṣiṣe iṣọn-injinia ti ara eniyan, pẹlu dida ara igara ti Escherichia coli JM109 / pPINS07, dabaru awọn sẹẹli kokoro nipa ipinya, yiya sọtọ awọn ara ifisi ti o ni amuaradagba arabara, tuka wọn ninu apo-ọja ti o ni urea ati dithiothreitol, tun ṣe atunṣe ati sọ di mimọ amuaradagba hyatidized ojoriro ti awọn iṣiro ailabo ni 40% isopropanol atẹle nipa chromatography lori KM-sepharose, itẹlera atẹle rẹ pẹlu trypsin ati carboxypeptidase B, lakoko ti awọn ọja trypsinolysis jẹ chromatographed lori SP-Sepharose, ti ni afiwe pẹlu 0.03-0.1 M ammonium acetate buffer pH 5.0-6.0 ti o ni 6 M urea, pẹlu iyọkuro amuaradagba pẹlu iyọdawọn ila kan ti iṣuu soda iṣuu 0 0 si 0 0 M ni bibẹrẹ ajekii, ati ida ida hisulini ti o gba lẹhin fifọ pẹlu epoxypoptidase B ni a sọ di mimọ nipasẹ ipin yiyipada iṣẹ omi ọpọlọ olomi (RP HPLC) atẹle nipa iṣere jeli (Pat. RF No. 2141531, MKI C12P 21/02, publ. Ọdun 1999)

Awọn aila-nfani ti ọna pẹlu lilo ti awọn iwọn nla ti urea ati awọn nkan alakan alakan ni ipele ti mimọ ti amuaradagba arabara.

Onidan aladun

Ṣaaju lilo insulin, ireti igbesi aye alaisan kan ti o ni àtọgbẹ mellitus ko si ju ọdun 10 lọ. Kiikan oogun yii ti fipamọ awọn miliọnu awọn alaisan. Hisulini jiini ti eniyan ni ilọsiwaju tuntun ninu imọ-jinlẹ.

Abajade ti ọpọlọpọ ọdun ti iṣẹ lile

Ṣaaju ki o to kiikan ti ẹrọ jiini (atunlo) igbaradi, hisulini ti sọtọ kuro ninu awọn ẹran ti ẹran ati elede.

Iyatọ laarin hisulini porcine ati eniyan jẹ amino acid kan

Awọn alailanfani ti ọna yii lati gba oogun:

• complexity ti ipamọ ati gbigbe ti awọn ohun elo aise ti ibi,
• aisi ẹran
• awọn iṣoro ti o ni nkan ṣe pẹlu ipinya ati mimọ ti homonu ẹdọforo,
• eewu giga ti awọn aati inira.

Pẹlu iṣelọpọ ti isulini eniyan ti ara ni bioreactor ni ọdun 1982, akoko tuntun ti imọ-ẹrọ bẹrẹ. Ti o ba jẹ pe ni kutukutu ti itọju isulini, ibi-afẹde ti awọn onimo ijinlẹ sayensi jẹ iwalaaye alaisan nikan, ni akoko wa idagbasoke ti awọn oogun titun ni ero lati ṣaṣeyọri isanpada alagbero fun arun naa. Erongba akọkọ ti iwadii imọ-jinlẹ ni lati mu didara igbesi aye alaisan kan jẹ pẹlu alakan.

Imọ ẹrọ igbalode

Awọn oriṣi oogun, da lori ọna ti igbaradi:

Kini yoo ṣẹlẹ ninu ara lẹhin iṣakoso oogun?

Nsopọ pẹlu olugba ti awo inu sẹẹli, hisulini jẹ eka ti o ṣe ilana awọn ilana wọnyi:

1. Imudarasi ọkọ gbigbe ẹjẹ ti inu intracellular ati mu irọrun gbigba.
2. Ṣe iṣeduro itusilẹ awọn ensaemusi ti o ni ipa ninu sisẹ glukosi.
3. O dinku oṣuwọn ti dida glycogen ninu ẹdọ.
4. Stimulates ọra ati iṣelọpọ amuaradagba.

Ninu ọran ti iṣakoso subcutaneous, hisulini bẹrẹ lati ṣe ni iṣẹju 20-25. Iye akoko oogun naa lati wakati marun si 8. O ti di mimọ siwaju nipasẹ insulinase enzymu ati ti yọ si ito. Oogun naa ko kọja ni ibi-ọmọ tabi ko kọja sinu wara-ọmu.

Nigbawo ni a ti fun ni ni insulinini ti ẹrọ atunse?

Ti o ba nilo iranlọwọ dekun

Inulinini ẹrọ ti ara eniyan ti lo ni awọn ọran wọnyi:

1. Iru 1 tabi àtọgbẹ 2. O jẹ lilo bi itọju ominira tabi ni apapo pẹlu awọn oogun miiran.
2. Pẹlu resistance si awọn aṣoju hypoglycemic oral.
3. Pẹlu àtọgbẹ ni awọn aboyun.
4. Ni ọran ti awọn ilolu lati awọn kidinrin ati ẹdọ.
5. Nigbati o ba yipada si insulin ti n ṣiṣẹ ṣiṣe pẹ.
6. Ni akoko asọtẹlẹ.
7. Ninu ọran ti awọn ipo idẹruba igbesi aye (hyperosmolar tabi ketoacidotic coma).
8. Ni awọn ipo pajawiri (ṣaaju ibimọ, pẹlu awọn ipalara).
9. Ti awọn egbo awọ dystrophic wa (ọgbẹ, furunhma).
10. Itọju àtọgbẹ lodi si ipilẹ ti ikolu.

Hisulini inini nipa eto eniyan ti ni ifarada daradara ati pe ko fa awọn aati inira, nitori pe o jẹ aami kanna si homonu ẹda.

Nigbagbogbo ibojuwo jẹ pataki!

O jẹ ewọ lati ṣe ilana oogun ni ọran ti:

• sokale suga ẹjẹ
• hypersensitivity si awọn oogun.

Ni awọn ọjọ akọkọ lẹhin ipade ti oogun, abojuto abojuto ti alaisan ni pataki.

Awọn ipa ẹgbẹ

Ijiyan Urticaria! Ẹya ede Quincke!

Ni awọn iṣẹlẹ ti o ṣọwọn, nigba lilo insulin, awọn ilolu wọnyi ni o ṣee ṣe:

• Awọn apọju inira (urticaria, ede ede Quincke, ara ti awọ),
• idinku didasilẹ ninu suga ẹjẹ (dagbasoke nitori kiko ti oogun nipa ara tabi ni iṣẹlẹ ti rogbodiyan ajesara),
• ailagbara mimọ
• Ni awọn ọran ti o lagbara, idagbasoke idagbasoke awọ-ara le ṣee ṣe,
• Ongbẹ, gbẹ gbẹ, gbigbẹ, ipadanu,
• hyperglycemia (nigba lilo oogun naa lodi si ipilẹ ti arun tabi iba),
• Pupa oju
• awọn aati agbegbe ni agbegbe ti iṣakoso (sisun, nyún, atrophy tabi afikun ti ọra subcutaneous).

Nigba miiran aṣamubadọgba si oogun naa wa pẹlu ibajẹ bii wiwu ati airi wiwo. Awọn ifihan wọnyi maa parẹ lẹhin ọsẹ diẹ.

Bawo ni lati wa hisulini ti injinia lọwọlọwọ ni ile elegbogi?

Oogun naa wa ni irisi ojutu kan fun iṣakoso parenteral:

Ko nira lati yan igbaradi hisulini mu sinu awọn abuda onikaluku ti alaisan.

Awọn ofin lilo

Nigbagbogbo, iṣakoso subcutaneous ti hisulini ni a lo.

Ni awọn ọran ti o yara, a ṣe abojuto oogun naa ni iṣan.

Ni ipo ti o nira ti alaisan

Paapaa alakan pẹlu iriri le ṣe aṣiṣe nigba lilo oogun naa.

Lati yago fun ilolu, o jẹ dandan:

1. Ṣaaju lilo, ṣayẹwo ọjọ ipari ti oogun.
2. Ṣe akiyesi awọn iṣeduro ibi ipamọ: Awọn abuku isaba yẹ ki o wa ni fipamọ ni firiji. Vial ti o dagbasoke ni a le fipamọ ni iwọn otutu yara ni aaye dudu.
3. Rii daju lati ranti iwọn lilo to tọ: ka iwe ti dokita lẹẹkansii.
4. Ṣaaju ki o to abẹrẹ, rii daju lati ṣe atẹgun atẹgun kuro ninu syringe.
5. Awọ yẹ ki o di mimọ, ṣugbọn o jẹ ohun aimọ lati lo oti fun sisọ, niwọn igba ti o dinku ndin ti oogun naa.
6. Yan aaye ti o dara julọ fun abẹrẹ. Nigbati a ba ṣafihan labẹ awọ ti ikun, oogun naa yoo ṣiṣẹ yarayara. Ifunra ti o lọra ti insulin nigbati a ṣe afihan sinu agbo gluteal tabi ejika.
7. Lo gbogbo agbegbe agbegbe (idena ti awọn ilolu agbegbe). Aaye laarin awọn abẹrẹ yẹ ki o wa ni o kere ju 2 cm.
8. Di awọ ara ni jinjin lati dinku eewu ti sunmọ sinu iṣan.
9. Fi abẹrẹ sii labẹ awọ ara ni igun kan ki oogun naa má ba yọ.
10. Nigbati a ba fi sinu ikun, a fi nṣakoso hisulini kukuru-ṣiṣẹ ni iṣẹju 20 ṣaaju ounjẹ. Ni ọran ti yiyan ejika tabi awọn abọ - awọn ọgbọn iṣẹju ṣaaju ounjẹ.

Apapo pẹlu awọn oogun miiran

Nigbagbogbo pẹlu àtọgbẹ, alaisan naa gba awọn oogun pupọ. Ijọpọ pẹlu awọn oogun miiran le ni ipa ipa itọju ti hisulini atunse inini.

Lati yago fun ilolu, o nilo lati mọ:

Iṣejuju

Ni awọn ọrọ miiran, iṣakoso insulini yorisi idinku lojiji ninu suga ẹjẹ. Iṣoro naa nigbagbogbo dide nitori yiyan iwọn lilo aibojumu.

Awọn aami aiṣedeede ti hypoglycemia:

• ailera
• pallor ti awọ
• ipinle ṣàníyàn
• iwara
• disoriation
• ipalọlọ ti awọn ọwọ, awọn ese, ahọn ati ète,
• awọn ọwọ wiwọ
• tutu lagun
• imolara ti o lagbara ti ebi
• orififo.

Ibanilẹru; ibajẹ lojiji ni alafia

Ti o ba ṣe akiyesi iru awọn aami aisan bẹ ninu ara rẹ, o nilo lati ni kiakia jẹ nkan ti o ni awọn kabotiraọnu ti o rọ O le jẹ awọn kuki, suwiti, nkan gaari tabi akara funfun. Tii ti o dun ni iranlọwọ ni iru awọn ipo.

Ti ipo naa ba buru si, o gbọdọ pe ọkọ alaisan kan. Arun inu ẹjẹ le ja si inu tabi iku alaisan naa.

Njẹ hisulini atunlo tunṣe?

Kaabo Hisulini atunlo ko si yatọ si si ẹda. Lati gba rẹ, a lo awọn kokoro arun abinibi atilẹba.

Lilo awọn imọ-ẹrọ ti jiini, DNA atunlo kan ti o ni jiini hisulini ni a tẹ sinu sẹẹli ti E. coli. Awọn ohun-ara titunti títúnṣe pọ si ati gbekalẹ homonu kan. Oogun naa munadoko pupọ ati pe o ni iwọn giga ti isọdọmọ.

Hisulini Apakan II. Microbiological iṣelọpọ iṣelọpọ

paati idapọmọra - ni irọrun irọrun ipinya ti amuaradagba arabara.

Ni ọran yii, awọn mejeeji awọn paati wọnyi le wa ni nigbakannaa lọwọlọwọ ninu akojọpọ ti amuaradagba arabara.

Ni afikun, nigba ṣiṣẹda awọn ọlọjẹ arabara, opo ti multidimensionality le ṣee lo (iyẹn ni, awọn adakọ pupọ ti polypeptide afojusun wa ni amuaradagba arabara), eyiti o le mu alekun ga julọ ti ọja afojusun.

2 Iṣalaye ti proinsulin ni awọn sẹẹli E. coli ..

Ninu iṣẹ naa, awọn onkọwe lo igara JM 109 N1864 pẹlu atẹgun nucleotide ti a fi sinu pilasima ti n ṣalaye amuaradagba arabara, eyiti o ni proinsulin laini ati apa kan ti amuaradagba Staphylococcus aureus A ti so mọ N-terminus rẹ nipasẹ iṣẹku methionine.

Ogbin ti awọn baamu aye ti o kun fun awọn sẹẹli ti igbin adaṣe pese ipilẹṣẹ iṣelọpọ ti amuaradagba arabara, ipinya ati iyipada ọna atẹle eyiti eyiti inu tube yorisi insulin.

Ẹgbẹ miiran ti awọn oniwadi gba amuaradagba atunbokan ninu eto ikosile ti kokoro ti o jẹ ti proinsulin eniyan ati iru polyhistidine ti o so mọ pẹlu nipasẹ iṣẹku methionine. O ti ya sọtọ ni lilo chromatography ti chelate lori awọn ọwọn Ni-agarose lati awọn ara ti o kun ati pe o ni eegun pẹlu cyanogen bromide.

Ṣiṣayẹwo ati onínọmbà ibi-iṣaju ti proinsulin ti a ti sọ di mimọ nipasẹ chromatography paṣipaarọ lori resini paṣipaarọ anion ati RP (alakoso iyipada) HPLC (chromatography omi ti o ga pupọ) ṣafihan niwaju awọn afara disulfide ti o baamu si afara afara ti proinsulin abinibi eniyan. Iwe naa ṣe ijabọ lori idagbasoke ti ọna tuntun, ọna ilọsiwaju fun iṣelọpọ eniyan nipasẹ iṣelọpọ jiini ni awọn sẹẹli prokaryotic. Awọn onkọwe rii pe hisulini ti iyọrisi ninu eto rẹ ati iṣẹ iṣe ti ibi jẹ aami si homonu ti o ya sọtọ lati inu.

Laipẹ, a ti san akiyesi sunmọ si irọrun ilana naa fun iṣelọpọ insulini atunlo nipasẹ imọ-ẹrọ jiini. Nitorinaa, awọn onkọwe gba amuaradagba ifunmọ ti o jẹ ti peptide oludari ti interleukin 2 ti o so pọ si N-terminus ti proinsulin nipasẹ iṣẹku lysine.

A ṣe alaye amuaradagba daradara ati ti agbegbe ni awọn ara ifisi. Lẹhin ipinya, amuaradagba ti walẹ pẹlu trypsin lati ṣe iṣelọpọ insulin ati C-peptide. Ẹgbẹ miiran ti awọn oniwadi ṣe ni ọna kanna.

Amuaradagba ifunmọ ti o ni proinsulin ati awọn ibugbe sintetiki meji ti staphylococcus A ti sopọ IgG amuaradagba ni awọn ara ifisi, ṣugbọn ni ipele ikosile ti o ga julọ. Awọn amuaradagba naa ni iyasọtọ nipasẹ chromatography ijora nipa lilo IgG ati ṣiṣe pẹlu trypsin ati carboxypeptidase B.

Iṣeduro iyọrisi ati C-peptide ni a di mimọ nipasẹ RP HPLC. Nigbati o ba n ṣẹda awọn ẹya ara ẹrọ, ipin ibi-ti amuaradagba ti ngbe ati polypeptide afojusun jẹ pataki pupọ.

Nitorinaa, iṣẹ naa ṣe apejuwe ikole awọn ẹya ara iru, nibiti o ti lo amuaradagba ti o so ara ara eniyan albumin bi polypeptide ti ngbe. Ọkan, mẹta ati meje C-peptides ni a so mọ.

Awọn asopọ C-peptides ni asopọ lori ipilẹ-iru-ori lilo awọn alafo amino acid ti o gbe aaye ihamọ ihamọ Sfi I ati awọn iṣẹku arginine meji ni ibẹrẹ ati ni opin alaṣẹ fun pipin amuaradagba ti o tẹle pẹlu trypsin. HPLC ti awọn ọja fifa fi han pe fifa ti C-peptide jẹ iwọn, ati pe eyi ngbanilaaye lilo awọn jiini ti a fun pọ pọ lati gba polypeptides ti o fojusi lori iwọn ile-iṣẹ.

Iṣẹ naa ṣe apejuwe igbaradi ti mutanti proinsulin, eyiti o ni rirọpo ti Arg32Tyr. Nigbati a ba fi imọ-amuaradagba yii pọ pẹlu trypsin ati carboxypeptidase B, hisulini abinibi ati C-peptide ti o ni iṣẹku tyrosine jẹ dida. Ni igbehin, lẹhin ti o samisi aami 125I, o nlo ni agbara ni radioimmunoassay. 3 Isọmọ hisulini.

Insulini ti a pinnu fun iṣelọpọ awọn oogun gbọdọ jẹ ti mimọ giga. Nitorinaa, iṣakoso didara to munadoko ti mimọ ti awọn ọja ti o gba ni ipele kọọkan ti iṣelọpọ jẹ dandan. Ni iṣaaju, RP ati IO (paṣipaarọ ion) HPLC ni a lo lati ṣe apejuwe proinsulin-S-sulfonate, proinsulin, A- ati B-ẹwọn, ati S-sulfonates wọn.

Ifarabalẹ ni a tun san si itọsi hisulini insulin. Ninu iṣẹ naa, awọn onkọwe ṣewadi ibẹwẹ ati ifitonileti ti awọn ọna chromatographic ninu igbekale awọn ọja ni gbogbo awọn ipo ti iṣelọpọ insulin eniyan ati gbekalẹ iṣeto ti awọn iṣẹ chromatographic lati lọtọ ati ṣe apejuwe awọn ọja ti o yọrisi.

Ni afikun, awọn isunmọ ti wa ni idagbasoke lati ṣe adaṣe ati yara awọn ilana fun ṣiṣe ipinnu mimọ ati opoiye ti hisulini.

Iwe naa ṣe ijabọ lori awọn ijinlẹ ti o ṣeeṣe nipa lilo chromatography omi RP pẹlu iṣawari elektrokemika fun ipinnu ti hisulini, ati ọna fun ipinnu ipinnu isulini ti o ya sọtọ si erekusu ti Langerhans nipasẹ chromatography immunoaffinity pẹlu iṣawari spectrometric ni idagbasoke.

Ninu iṣẹ naa, iṣeeṣe ti lilo ipinnu-iyara micro-iyara ti insulin lilo caprol electrophoresis pẹlu iṣawari laser-fluorescence ti ṣe iwadii. Itupalẹ naa ni a ṣe nipasẹ fifi si ayẹwo naa iye ti o mọ ti insulin ti a ṣe aami pẹlu phenylisothiocyanate (FITC) ati ida kan Fab ti awọn ọlọjẹ hisulini monoclonal. Ti a wọ ati awọn insulins igbagbogbo ṣe ifigagbaga pẹlu eka Fab. FITZ-insulin insulini ati eka rẹ pẹlu Fab ti wa ni niya ni awọn aaya 30.

Laipẹ, nọmba nla ti awọn iṣẹ ni a ti yasọtọ si ilọsiwaju ti awọn ọna iṣelọpọ hisulini, bii ṣiṣẹda awọn fọọmu iwọn lilo ti o da lori rẹ.

Fun apẹẹrẹ, ni AMẸRIKA, awọn analogs hisulini ẹdọforo ti jẹ itọsi, ti o yatọ si homonu ẹda nitori ifihan ti awọn iṣẹku amino acid oriṣiriṣi ni awọn ipo 13-15 ati 19 ti pq A ati ni ipo 16 ti pq B.

Awọn analogues ti o gba ni a lo ni ọpọlọpọ parenteral (iṣan, iṣan, iṣan-inu), awọn ọna gbigbemu iṣan tabi fifa ni irisi awọn kapusulu pataki ni itọju ti àtọgbẹ mellitus. Ti pataki kan ni ẹda ti awọn fọọmu iwọn lilo ti a ṣakoso laisi abẹrẹ.

Iwe naa jabo lori ẹda ti eto iṣakoso ọpọlọ macromolecular, eyiti o jẹ insulin ainidijẹ ni iwọn didun ti polymer hydrogel ti a yipada pẹlu awọn inhibitors enzyme proteolytic. Ndin ti iru oogun bẹẹ jẹ 70-80% ti ndin ti subcutaneously ṣafihan insulin abinibi.

Ninu iṣẹ miiran, a gba oogun kan nipasẹ ifun ọkan-ipele ti hisulini pẹlu awọn sẹẹli ẹjẹ pupa, ti a mu ni ipin kan ti 1-4: 100, niwaju oluranlowo adehun.Awọn onkọwe ṣe ijabọ gbigba ti oogun kan pẹlu iṣe ti 1000 sipo / g, itọju ṣiṣe ni pipe lẹhin iṣakoso oral ati ibi ipamọ fun ọpọlọpọ ọdun ni ọna lyophilized.

Ni afikun si ṣiṣẹda awọn oogun titun ati awọn fọọmu iwọn lilo ti o da lori hisulini, awọn ọna tuntun ni a ṣe idagbasoke lati yanju iṣoro ti àtọgbẹ.

Nitorinaa, awọn onkọwe yipo amuaradagba gbigbe ẹjẹ ti glucose cDNA tẹlẹ ni iṣapẹẹrẹ pẹlu isunmọ insulin kikun-awọ ti awọn sẹẹli HEP G2.

Ni awọn ere ibeji HEP G2 Insgl ti a gba, glukosi ṣe ifunra sunmo isunmọ hisulini deede ati ni agbara esi ikoko si awọn ohun elo ifamọ miiran.

Labẹ maikirosikopu immunoelectron, a ri awọn eepo-insulin ninu awọn sẹẹli ti o jọra si awọn granules ni awọn b-ẹyin ti awọn erekusu ti Langerhans. O ṣeeṣe ti lilo “b-cell atọwọda” ti a gba nipasẹ awọn ọna ẹrọ jiini fun itọju ti àtọgbẹ mellitus iru 1 wa lọwọlọwọ ijiroro to ṣe pataki.

Paapọ pẹlu ipinnu awọn iṣoro to wulo, awọn ọna ṣiṣe ti hisulini, bi daradara bi awọn igbekale ati awọn ibatan iṣẹ-ṣiṣe ni ohun alumọni, ni a ṣe iwadi. Ọkan ninu awọn ọna iwadii ni ṣiṣẹda awọn oriṣiriṣi awọn itọsẹ ti hisulini ati iwadii ti fisiksi ati ohun-ini imuni-23, 24.

Gẹgẹbi a ti sọ loke, awọn nọmba pupọ ti iṣelọpọ fun iṣelọpọ hisulini da lori iṣelọpọ homonu yii ni irisi idasi (proinsulin), atẹle pẹlu isọsi enzymatic si hisulini ati C-peptide. Ni bayi, ifarahan iṣẹ-ṣiṣe ti ẹda ti han fun C-peptide, eyiti o jẹ ki o ṣee ṣe lati lo fun awọn idi iwosan aranmọ pẹlu hisulini.

Ninu awọn nkan atẹle ti jara yii, ẹda-jiini ati awọn ohun-ini ẹda ti C-peptide, ati awọn ọna fun igbaradi rẹ, ni ao gbero.

Imọ-ẹrọ nipa imọ-ẹrọ ni iṣelọpọ awọn oogun

Ti awọn anfani jẹ awọn idagbasoke fun gbigba ẹya 20K ti STGh. Iṣẹ-ṣiṣe ti o ni ileri ni lati gba ati ṣe iwadi kii ṣe ọpọlọpọ awọn ọna ti STH nikan, ṣugbọn tun ṣe alaigbọran STH lati le gba iṣẹ gigun ti homonu naa. Ọna atilẹba ti ni idagbasoke fun gbigba STHch alailowaya pẹlu igbese gigun.

Ni afiwe pẹlu iṣelọpọ ti STH, imọ-ẹrọ imudọgba atilẹba fun iṣelọpọ awọn homonu ti adenohypophysis, pẹlu gbogbo awọn ti o jẹ ẹya-ara, ati diẹ ninu awọn iyipada wọn lati GST ni a ṣẹda. Ti pataki nla ni imuse eto ti a fojusi lati ṣẹda oogun itọju ailera STH (somatogen), ti a gba nipasẹ imọ-ẹrọ jiini.

Iriri ti iṣoogun ti han pe, iṣapeye itọju ti ifọle, o ni imọran lati ni ninu apo-iwe ọpọlọpọ awọn igbaradi oogun eleto ti o gba nipasẹ awọn imọ-ẹrọ pupọ tabi paapaa awọn ọna (MF, Ausomatin, Somatogen).

Itọju igba pipẹ (fun awọn ọdun) pẹlu igbaradi ọkan ti STHh n fa idinku idinku ninu ifamọ inu ara.

Ni apakan, eyi le jẹ abajade ti dida awọn aporo, ṣugbọn idi akọkọ gbọdọ wa ni ipele ti awọn olugba ati ṣiṣe homonu.

Ṣiṣẹ pẹlu GST, gẹgẹbi awọn ijinlẹ ti okeerẹ ti awọn homonu ti o ni ifipamo ati ọpọlọpọ awọn fọọmu wọn jẹ ki o ṣee ṣe lati kawe awọn eto ti a ṣẹda nipasẹ iseda ati ni oye wọn dara. Aye ti awọn oriṣiriṣi abinibi ti STH ninu ara tọka si iṣeeṣe wọn ati lilo ṣeeṣe, fun apẹẹrẹ, ninu ile-iwosan kan.

Nigbati o ba ṣẹda awọn igbaradi STHch tuntun, o jẹ pataki ni akọkọ lati dojukọ awọn fọọmu abinibi abinibi ti homonu naa ati, ti o ba yẹ, lati ṣe iwọn wọn nipasẹ imọ-ẹrọ jiini, gẹgẹ bi a ṣe pẹlu monomer STHch.

Ninu iṣelọpọ ti awọn igbaradi STHch lati GST, imọ-ẹrọ imọ-ẹrọ ti o kun fun iṣelọpọ ti awọn homonu miiran ti adenohypophysis (LGH, FSHch, TTGch ati awọn omiiran) ti ni imuse ni ifijišẹ. O jẹ dandan lati mu iṣelọpọ ṣiṣẹ nipa iṣafihan awọn ọna ilọsiwaju tuntun (chromatography affinity, bbl

), gba awọn homonu funfun ti o ga pupọ nipa lilo imọ-ẹrọ imudọgba.

O jẹ dandan lati faagun iṣelọpọ ati lilo awọn tosii ti immunomicroanalysis ti awọn homonu ti adenohypophysis fun okunfa ati imọ-ẹrọ, lati mu iṣelọpọ ti ilana ti awọn ẹla ara idiwọn ti awọn iwọn oriṣiriṣi, lati ṣẹda awọn igbaradi STHch tuntun, pẹlu awọn ainidibajẹ.

Otitọ pe STH ni ipa lori amuaradagba, ọra, ati ti iṣelọpọ alumọni, n ṣe ni ipele sẹẹli laisi ipin ti o jẹ afẹsodi, ati pe o jẹ anabolic, n fun awọn ireti nla fun lilo rẹ lati mu awọn ilana atunṣe ṣe ati tọju ọpọlọpọ awọn arun. Iwadii ti o gbooro ti awọn ọran wọnyi, bi o ṣe ṣeeṣe ki o lo awọn ọna oriṣiriṣi ti yipada ati awọn iyatọ ti STGch, jẹ iṣẹ-ṣiṣe ti o ni iyara ati ni ileri.

Gbigba insulin ninu imọ-ẹrọ

Insulini, homonu peptide ti awọn erekusu ti Langerhans ti oronro, ni itọju akọkọ fun àtọgbẹ. Arun yii n fa nipasẹ aipe hisulini ati pe a ṣe afihan nipasẹ ilosoke ninu glukosi ẹjẹ. Titi laipe, a ti gba hisulini lati inu awọn akọmalu kan ati ti ẹlẹdẹ.

Oogun naa ṣe iyatọ si hisulini eniyan nipa awọn aropo amino acid 1, nitorinaa irokeke awọn ifura aisi, pataki ni awọn ọmọde. Lilo oogun itọju ti itankalẹ jakejado jẹ idiyele nipasẹ idiyele giga ati awọn orisun to lopin.

Nipa iyipada kemikali, hisulini lati inu awọn ẹranko ni a sọ di aibikita lati ọdọ eniyan, ṣugbọn eyi tumọ si afikun afikun ni idiyele ọja naa.

Lati ọdun 1982, EliLilly ti n ṣe agbejade hisulini ti a fi eto jiini da lori iyasọtọ iyasọtọ ti awọn ẹwọn E. colie A ati B. Iye idiyele ọja ti dinku ni pataki, iṣeduro insulin jẹ aami si eniyan. Lati ọdun 1980, awọn ijabọ ti wa ninu atẹjade nipa cloning ti pupọ proinsulin, iṣaju homonu kan ti o yipada si fọọmu ogbo kan pẹlu idaabobo to lopin.

Imọ-ẹrọ Encapsulation tun ni a lo si itọju àtọgbẹ: awọn sẹẹli ti o ni ifun ni kapusulu, ti a ṣafihan lẹẹkan si ara alaisan, ṣe agbejade hisulini lakoko ọdun.

Awọn ẹyọkan Jiini ti ṣe ifilọlẹ follicle-safikun ati awọn homonu luteinizing. Awọn peptides wọnyi ni awọn ipin-meji. Lori eto yii ni iṣelọpọ ile-iṣẹ ti awọn homonu oligopeptide ti eto aifọkanbalẹ - enkephalins, ti a kọ lati awọn iṣẹku amino acid 5, ati awọn endorphins, analogues ti morphine.

Nigbati a ba lo ni iwọntunwọnsi, awọn peptides wọnyi yọ irora, ṣẹda iṣesi ti o dara, mu iṣẹ pọ si, akiyesi idojukọ, mu iranti pọ si, ati fi oorun si oorun ati jiji.

Apẹẹrẹ ti ohun elo aṣeyọri ti awọn ọna ẹrọ jiini ni iṣelọpọ ti p-endorphin lilo imọ-ẹrọ amuaradagba arabara ti a ṣalaye loke fun homonu peptide miiran, somatostatin.

Awọn ọna lati ṣe agbejade hisulini eniyan:

Ni itan, ọna akọkọ lati gba hisulini fun awọn idi itọju ailera ni ipinya ti awọn analogues ti homonu yii lati awọn orisun adayeba (awọn erekusu ti oronro ti ẹran ati elede).

Ni awọn ọdun 20s ti orundun to kẹhin, a rii pe awọn bouline ati insulins ẹran ẹlẹdẹ (eyiti o sunmọ si insulini eniyan ni ṣiṣe ati ilana amino acid) ṣafihan iṣẹ ninu ara eniyan ti o ṣe afiwe si hisulini eniyan. Lẹhin eyi, a lo insulini tabi hisulini ẹlẹdẹ fun igba pipẹ lati tọju awọn alaisan ti o ni àtọgbẹ Iru I.

Bibẹẹkọ, lẹhin igba diẹ o han pe ni awọn igba miiran awọn apo-ara si bovine ati hisulini insulin bẹrẹ lati kojọ ninu ara eniyan, nitorinaa ṣe aito ipa wọn.

Ni apa keji, ọkan ninu awọn anfani ti ọna yii lati gba insulin ni wiwa ti awọn ohun elo aise (bovine ati hisulini ẹran ẹlẹdẹ le ni irọrun gba ni awọn iwọn nla), eyiti o ṣe ipa ipinnu ni idagbasoke idagbasoke ọna akọkọ fun iṣelọpọ insulin eniyan.Ọna yii ni a pe ni olokun-sintetiki.

Ninu ọna yii ti iṣelọpọ eniyan, a lo insulini ẹlẹdẹ bi ifunni. Octapeptide C-ebute ti pq pq ni a ti wẹ mọ kuro ninu isulini ti ẹgbin insulin, lẹhin eyiti o jẹ iṣọpọ C-ebute octapeptide ti hisulini eniyan.

Lẹhinna o ti fiwe mọ ara rẹ, a yọ awọn ẹgbẹ aabo kuro ati hisulini iyọrisi ti di mimọ. Nigbati o ba ṣe idanwo ọna yii lati gba hisulini, idanimọ ti o pe homonu ti o gba si hisulini eniyan fihan.

Ailagbara akọkọ ti ọna yii ni idiyele giga ti insulin ti abajade (paapaa ni bayi, iṣelọpọ kemikali ti octapeptide jẹ igbadun ti o gbowolori, paapaa lori iwọn ile-iṣẹ).

Lọwọlọwọ, hisulini eniyan ni a gba ni awọn ọna meji: nipasẹ iyipada ti hisulini hisulini nipasẹ ọna-ensaemusi iyipo ati nipasẹ ọna imọ-jiini.

Ninu ọrọ akọkọ, ọna naa da lori otitọ pe hisulini ẹlẹdẹ yatọ si insulini eniyan ni aropo ọkan ni C-terminus ti pq Ala30Thr B.

Rirọpo ti alanine pẹlu threonine ni a ti gbejade nipasẹ isọsi enzymu-catalyzed ti alanine ati afikun ti isunku threonine ti o ni idaabobo nipasẹ ẹgbẹ ọkọ ayọkẹlẹ dipo rẹ, eyiti o wa ni iwọn nla ni idapọpọ ifura. Lẹhin fifọ ti ẹgbẹ O-tert-butyl aabo, o gba insulin eniyan.

Insulini jẹ amuaradagba akọkọ ti a gba fun awọn idi iṣowo nipa lilo imọ-ẹrọ DNA ti a ṣe atunṣe. Awọn ọna akọkọ meji ni o wa fun sisilẹ hisulini eleda eniyan.

Ninu ọrọ akọkọ, lọtọ (oriṣiriṣi awọn igara ti iṣelọpọ) ni a gba fun awọn ẹwọn mejeeji atẹle nipa gbigbe pọ ti sẹẹli (dida awọn afara disulfide) ati pipin awọn isoforms.

Ni ẹẹkeji, iṣelọpọ ni irisi ẹrọ iṣaaju (proinsulin) atẹle nipa walẹ enzymatic pẹlu trypsin ati carboxypeptidase B si fọọmu ti nṣiṣe lọwọ ti homonu.

Lọwọlọwọ, o jẹ ayanfẹ julọ lati gba hisulini ni irisi ọna iṣaaju, eyiti o ṣe idaniloju pipade deede ti awọn afara disulfide (ninu ọran ti igbaradi lọtọ ti awọn ẹwọn, awọn ọna aṣeyọri ti denaturation, pipin ti isoforms ati renaturation ni a gbe jade).

Pẹlu awọn isunmọ mejeeji, o ṣee ṣe mejeeji lati gba gba awọn ohun elo ti o bere (A- ati B-dè tabi proinsulin), ati gẹgẹ bi apakan awọn ọlọjẹ arabara. Ni afikun si awọn ẹwọn A ati B tabi proinsulin, awọn ọlọjẹ arabara le ni:

1) amuaradagba ti ngbe - n pese gbigbe irinna ti amuaradagba arabara sinu aaye periplasmic ti sẹẹli kan tabi alabọde aṣa,

2) paati ibaramu - irọrun ni irọrun ipinya ti amuaradagba arabara.

Ni ọran yii, awọn mejeeji awọn paati wọnyi le wa ni nigbakannaa lọwọlọwọ ninu akojọpọ ti amuaradagba arabara. Ni afikun, nigba ṣiṣẹda awọn ọlọjẹ arabara, opo ti multidimensionality le ṣee lo (iyẹn ni, awọn adakọ pupọ ti polypeptide afojusun wa ni amuaradagba arabara), eyiti o le mu alekun ga julọ ti ọja afojusun.

Iṣalaye ti proinsulin ni awọn sẹẹli E. coli ..

Igara JM 109 N1864 pẹlu ilana atẹgun kan ti n ṣalaye amuaradagba akojọpọ, eyiti o ni proinsulin ti o laini ati ida kan amuaradagba A ti Staphylococcus aureus ti a so mọ N-terminus rẹ nipasẹ iṣẹku methionine, ni a lo.

Ogbin ti awọn baamu aye ti o kun fun awọn sẹẹli ti igbin adaṣe pese ipilẹṣẹ iṣelọpọ ti amuaradagba arabara, ipinya ati iyipada ọna atẹle eyiti eyiti inu tube yorisi insulin.

Ẹgbẹ miiran ti awọn oniwadi gba amuaradagba atunbokan ninu eto ikosile ti kokoro ti o jẹ ti proinsulin eniyan ati iru polyhistidine ti o so mọ pẹlu nipasẹ iṣẹku methionine. O ti ya sọtọ ni lilo chromatography ti chelate lori awọn ọwọn Ni-agarose lati awọn ara ti o kun ati pe o ni eegun pẹlu cyanogen bromide.

Ṣiṣayẹwo ati onínọmbà ibi-iṣaju ti proinsulin ti a ti sọ di mimọ nipasẹ chromatography paṣipaarọ lori resini paṣipaarọ anion ati RP (alakoso iyipada) HPLC (chromatography omi ti o ga pupọ) ṣafihan niwaju awọn afara disulfide ti o baamu si afara afara ti proinsulin abinibi eniyan. O tun jẹ ijabọ lori idagbasoke ti ọna tuntun, ọna ti o ni ilọsiwaju fun iṣelọpọ eniyan nipasẹ iṣelọpọ jiini ni awọn sẹẹli prokaryotic. Awọn onkọwe rii pe hisulini ti iyọrisi ninu eto rẹ ati iṣẹ iṣe ti ibi jẹ aami si homonu ti o ya sọtọ lati inu.

Laipẹ, a ti san akiyesi sunmọ si irọrun ilana naa fun iṣelọpọ insulini atunlo nipasẹ imọ-ẹrọ jiini. Nitorinaa, a gba amuaradagba akojọpọ pẹlu oriṣi peptide oludari ti interleukin ti o so pọ si N-terminus ti proinsulin nipasẹ iṣẹku iṣan lysine. A ṣe alaye amuaradagba daradara ati ti agbegbe ni awọn ara ifisi.

Lẹhin ipinya, amuaradagba ti walẹ pẹlu trypsin lati ṣe iṣelọpọ insulin ati C-peptide. Ẹgbẹ miiran ti awọn oniwadi ṣe ni ọna kanna. Amuaradagba ifunmọ ti o ni proinsulin ati awọn ibugbe sintetiki meji ti staphylococcus A ti sopọ IgG amuaradagba ni awọn ara ifisi, ṣugbọn ni ipele ikosile ti o ga julọ.

Awọn amuaradagba naa ti ya sọtọ nipasẹ chromatography ologbele ti IgG ati ti walẹ pẹlu trypsin ati carboxypeptidase B. Ijẹrisi to ni abajade ati C-peptide ti di mimọ nipasẹ RP HPLC. Nigbati o ba n ṣẹda awọn ẹya ara ẹrọ, ipin ibi-ti amuaradagba ti ngbe ati polypeptide afojusun jẹ pataki pupọ.

Ijuwe ikole awọn iṣepo ni a ṣalaye nibiti a ti lo amuaradagba abuda albumin eniyan bi polypeptide ti ngbe. Ọkan, mẹta ati meje C-peptides ni a so mọ.

Awọn asopọ C-peptides ni asopọ lori ipilẹ-iru-ori lilo awọn alafo amino acid ti o gbe aaye ihamọ ihamọ Sfi I ati awọn iṣẹku arginine meji ni ibẹrẹ ati ni opin alaṣẹ fun pipin amuaradagba ti o tẹle pẹlu trypsin. HPLC ti awọn ọja fifa fi han pe fifa ti C-peptide jẹ iwọn, ati pe eyi ngbanilaaye lilo awọn jiini ti a fun pọ pọ lati gba polypeptides ti o fojusi lori iwọn ile-iṣẹ.

Gba proinsulin ti o ni ẹtọ, eyiti o ni rirọpo ti Arg32Tyr. Nigbati a ba fi imọ-amuaradagba yii pọ pẹlu trypsin ati carboxypeptidase B, hisulini abinibi ati C-peptide ti o ni iṣẹku tyrosine jẹ dida. Ni igbehin, lẹhin ti o samisi aami 125I, o nlo ni agbara ni radioimmunoassay.

Insulini ti a pinnu fun iṣelọpọ awọn oogun gbọdọ jẹ ti mimọ giga. Nitorinaa, iṣakoso didara to munadoko ti mimọ ti awọn ọja ti o gba ni ipele kọọkan ti iṣelọpọ jẹ dandan. Ni iṣaaju, RP ati IO (paṣipaarọ ion) HPLC ni a lo lati ṣe apejuwe proinsulin-S-sulfonate, proinsulin, A- ati B-ẹwọn, ati S-sulfonates wọn.

Ifarabalẹ ni a tun san si itọsi hisulini insulin. Ninu iṣẹ naa, awọn onkọwe ṣewadi ibẹwẹ ati ifitonileti ti awọn ọna chromatographic ninu igbekale awọn ọja ni gbogbo awọn ipo ti iṣelọpọ insulin eniyan ati gbekalẹ iṣeto ti awọn iṣẹ chromatographic lati lọtọ ati ṣe apejuwe awọn ọja ti o yọrisi.

Ni afikun, awọn isunmọ ti wa ni idagbasoke lati ṣe adaṣe ati yara awọn ilana fun ṣiṣe ipinnu mimọ ati opoiye ti hisulini.

Awọn ijinlẹ lori seese ti lilo chromatography omi RP pẹlu iṣawari elekitiro lati pinnu insulin ni a royin, ati pe ilana fun ipinnu ipinnu isọsi ti o ya sọtọ si erekusu Langerhans nipasẹ chromatography immunoaffinity pẹlu iṣawari spectrometric.

Ninu iṣẹ naa, iṣeeṣe ti lilo ipinnu-iyara micro-iyara ti insulin lilo caprol electrophoresis pẹlu iṣawari laser-fluorescence ti ṣe iwadii.Itupalẹ naa ni a ṣe nipasẹ fifi si ayẹwo naa iye ti o mọ ti insulin ti a ṣe aami pẹlu phenylisothiocyanate (FITC) ati ida kan Fab ti awọn ọlọjẹ hisulini monoclonal. Ti a wọ ati awọn insulins igbagbogbo ṣe ifigagbaga pẹlu eka Fab. FITZ-insulin insulini ati eka rẹ pẹlu Fab ti wa ni niya ni awọn aaya 30.

Hisulini jiini

Ibeere kini insulin ṣe ti jẹ iwulo kii ṣe fun awọn dokita ati awọn ile elegbogi nikan, ṣugbọn si awọn alaisan ti o ni àtọgbẹ mellitus, gẹgẹbi awọn ibatan ati awọn ọrẹ wọn.

Loni, homonu alailẹgbẹ ati bẹẹ pataki fun ilera eniyan ni o le gba lati awọn ohun elo aise nipa lilo awọn idagbasoke imọ-ẹrọ Pataki ati ni idanwo daradara. O da lori ọna ti igbaradi, awọn oriṣi wọnyi ti hisulini wa ni iyasọtọ:

• Ẹran ẹlẹdẹ tabi bovine, ti a tun pe ni ọja ẹranko
• Ti yipada ẹlẹdẹ biosynthetic ti a tunṣe
• Atunse ẹrọ titun tabi atunlo
• Atunṣe Ọya Jiini
• Sintetiki

Ti lo insulini ẹran ẹlẹdẹ ti o gun julọ fun àtọgbẹ. Ibẹrẹ ohun elo rẹ ti bẹrẹ ni ọdun 20s ti orundun to kẹhin.

O yẹ ki o ṣe akiyesi pe ẹran ẹlẹdẹ tabi ẹranko ni oogun nikan titi di 80s ti orundun to kẹhin. Lati gba rẹ, o ti lo ẹran ara ti o jẹ ohun elo tisu.

Sibẹsibẹ, ọna yii o le nira lati pe ni aipe tabi rọrun: ṣiṣẹ pẹlu awọn ohun elo aise ti ibi ko rọrun nigbagbogbo, ati pe ohun elo aise funrararẹ ko to.

Ni afikun, akojọpọ isulini ti porcine ko ni deede ni ibamu pẹlu akojọpọ ti homonu ti eniyan ti o ni ilera ṣe: ọpọlọpọ awọn iṣẹku amino acid wa ni bayi ni ṣiṣe wọn. O yẹ ki o ṣe akiyesi pe awọn homonu ti iṣelọpọ nipasẹ awọn ohun elo ti ẹran ni nọmba ti o tobi pupọ paapaa ti awọn iyatọ, eyiti a ko le pe ni lasan rere.

Ni iru igbaradi yii, ni afikun si nkan aladapọ oniduuro, ohun ti a pe ni proinsulin jẹ aipọ ninu, nkan ti ko le ya sọtọ nipa lilo awọn ọna imotuntun. O jẹ ẹniti o di orisun nigbagbogbo ti awọn aati inira, eyiti o lewu paapaa fun awọn ọmọde ati awọn agbalagba.

Awọn ile elegbogi lekansi fẹ lati ni owo lori awọn alagbẹ. Ọgbọn ara ilu Yuroopu igbalode kan wa, ṣugbọn wọn dakẹ nipa rẹ. Iyẹn.

Fun idi eyi, awọn onimo ijinlẹ sayensi kakiri aye ti nifẹ si mimu ẹda ti homonu ti awọn ẹranko mu wa ni ibamu ni kikun pẹlu awọn homonu ẹdọforo ti eniyan ti o ni ilera. Aṣeyọri gidi ni ile-iṣẹ oogun ati itọju ti àtọgbẹ ni iṣelọpọ ti oogun ologbele-sintetiki ti a gba nipasẹ rirọpo alanine amino acid ninu oogun ti orisun ẹranko pẹlu threonine.

Ni igbakanna, ọna-sintetiki fun iṣelọpọ homonu da lori lilo awọn igbaradi ẹranko. Ni awọn ọrọ miiran, wọn ṣe deede awọn iyipada ati di aami si awọn homonu ti awọn eniyan ṣe. Lara awọn anfani wọn ni ibamu pẹlu ara eniyan ati isansa ti awọn aati inira.

Awọn aila-nfani ti ọna yii pẹlu aito awọn ohun elo aise ati iṣoro ti ṣiṣẹ pẹlu awọn ohun elo ti ibi, bakanna pẹlu idiyele giga ti imọ-ẹrọ mejeeji funrara ati oogun ti abajade.

Ni iyi yii, oogun ti o dara julọ fun itọju ti àtọgbẹ jẹ hisulini atunṣe ti a gba nipasẹ ẹrọ ti Jiini.

Ni airotẹlẹ, a ma n pe ni hisulini ti injinia ni abinibi, nitorinaa o nfihan ọna lati gba rẹ, ati pe abajade abajade ni a pe ni insulin eniyan, nitorinaa tẹnumọ idanimọ pipe rẹ si awọn homonu ti iṣelọpọ ti awọn eniyan ti o ni ilera.

Lara awọn anfani ti hisulini ti injinia, ọkan yẹ ki o tun ṣe akiyesi iwọn giga rẹ ti mimọ ati aini proinsulin, bi daradara bi otitọ pe ko fa eyikeyi awọn aati inira ati pe ko ni contraindications.

Ibeere ti o beere nigbagbogbo jẹ igbaniloju: kini gangan ni hisulini atunṣe? O wa ni jade pe homonu yii ni iṣelọpọ nipasẹ awọn igara iwukara, bi daradara bi Escherichia coli, ti a gbe ni alabọde pataki ounjẹ. Pẹlupẹlu, iye ti ohun elo ti a gba jẹ tobi to pe o ṣee ṣe lati fi kọ silẹ patapata lilo awọn oogun ti o gba lati awọn ẹya ara ẹranko.

Nitoribẹẹ, eyi kii ṣe nipa E. coli ti o rọrun, ṣugbọn nipa tito-pupọ ti o yipada ati ti o lagbara lati ṣe iṣelọpọ insulin ti o ni abinibi eniyan, ẹda ati awọn ohun-ini ti eyiti o jẹ deede kanna bi homonu ti iṣelọpọ nipasẹ awọn sẹẹli ti oron ti eniyan ti o ni ilera.

Awọn anfani ti isulini ẹrọ ti jiini kii ṣe deede ibajọra rẹ si homonu eniyan, ṣugbọn tun irọrun ti igbaradi, iye to ti awọn ohun elo aise ati idiyele ti ifarada.

Awọn onimo ijinlẹ sayensi kakiri agbaye pe iṣelọpọ ti hisulini insulin jẹ ipinya gidi ni itọju ti àtọgbẹ. Idi pataki ti iṣawari yii jẹ nla ati pataki ti o nira lati ṣe iwọn rẹ.

O rọrun to lati ṣe akiyesi pe loni o fẹrẹ to 95% ti iwulo homonu yii ni a pade pẹlu iranlọwọ ti hisulini ti injinini.

Ni akoko kanna, ẹgbẹẹgbẹrun eniyan ti o ni aleji tẹlẹ si awọn oogun gba aye fun igbesi aye deede.

Mo ni dayabetisi fun ọdun 31. Ara wọn ti yá báyìí. Ṣugbọn, awọn agunmi wọnyi jẹ aito si awọn eniyan lasan, wọn ko fẹ lati ta awọn ile elegbogi, kii ṣe ere fun wọn.

Bawo ni hisulini imọ-ẹrọ ti n ṣiṣẹ

Ninu itọju ti iru àtọgbẹ 1 ti àtọgbẹ, a ti lo insulin onitẹsiwaju jiini eda eniyan meji-eniyan. Ni awọn ile elegbogi, o ta ni irisi ojutu kan ati pe o ni ami “Nifẹ”. Arun keji keji tun le ṣe itọju pẹlu iru oogun bẹẹ ti awọn oogun ti a paṣẹ fun ko ba dara fun alaidan kan.

Lilọ inulin ti ẹrọ titun mọwa tun nlo ti eniyan ba ni ipo ijẹun. Awọn onisegun nigbagbogbo ṣalaye awọn abẹrẹ si awọn obinrin ti o loyun ti o ni ayẹwo pẹlu mellitus àtọgbẹ nigbati awọn oogun ti o sọ gaari-suga ati ounjẹ ailera ko ṣe iranlọwọ.

Ni gbogbogbo, awọn insulini ti ipilẹṣẹ ti abinibi tabi awọn GMO ni a lo lakoko ibimọ, nigbati wọn ba n ṣiṣẹ abẹ, tabi ti o ba ni arun suga dayau. Oogun naa fun ọ laaye lati yipada lailewu si lilo ti awọn homonu ti o n ṣiṣẹ iyara.

1. Ṣaaju lilo imọ-jiini jiini ti ẹda eniyan, o jẹ dandan lati ṣe idanwo kan ki o rii boya oogun yii dara fun alaisan. Ti alatọ kan ba han hypoglycemia, lilo oogun naa kii ṣe iṣeduro.
2. Oftò iṣẹ ti ojutu ni pe hisulini ti injinia ṣe ibaraenisọrọpọ pẹlu awọn sẹẹli, eyiti o yori si dida awọn eka. Nigbati awọn sẹẹli ba wọ inu awọn ile-iṣọn wọnyi, wọn gbe wọn si bẹrẹ lati ṣiṣẹ ni agbara pupọ. Bi abajade, awọn ensaemusi diẹ sii ni a ṣejade.
3. Ninu ilana naa, glukosi mu iyara, awọn carbohydrates ti o wọ inu ara ni a nṣiṣe lọwọ. Nitorinaa, ẹdọ n jade glukosi gigun, ati awọn ọlọjẹ le fa iyara pupọ.

Ilana ti igbese ti oogun naa da lori iwọn lilo, iru isulini, yiyan aaye abẹrẹ. Eyikeyi ilana yẹ ki o ṣee ṣe nikan lẹhin adehun pẹlu ologun ti o wa deede si. Awọn abẹrẹ akọkọ ni a ṣe labẹ abojuto iṣoogun.

Awọn iṣeduro fun lilo oogun naa

Bii tabi insulin biphasic jiini ti ẹda eniyan ni awọn orukọ iṣowo oriṣiriṣi. Paapaa, awọn homonu le yatọ ni akoko iṣe, ọna ti igbaradi ojutu. Awọn ọja ti wa ni oniwa da lori iru hisulini.

Awọn insulini atunse ti ipilẹṣẹ jẹ apakan ti awọn oogun bii Humudar, Vozulim, Actrapid. Insuran, Gensulin. Eyi kii ṣe atokọ pipe ti iru awọn oogun, nọmba wọn tobi pupọ.

Gbogbo awọn oogun ti o loke wa yatọ si ni awọn ofin ti ifihan si ara.Awọn GMO le ṣiṣe ni awọn wakati pupọ tabi le ṣiṣẹ fun gbogbo awọn ọjọ.

Awọn oogun idapọ meji-pẹlu awọn oogun ti o ni awọn ohun elo kan ti o yi akoko ifihan si oogun naa.

• Awọn iru awọn oogun ni a ta ni irisi awọn apopọ, pẹlu awọn homonu ti o gba abinibi.
• Awọn owo wọnyi pẹlu Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
• A lo oogun ni igba meji ọjọ kan, idaji wakati ṣaaju ounjẹ. Iru eto yii yẹ ki o faramọ muna, nitori homonu naa ni ibatan taara si asiko ti o jẹ ounjẹ.

Nipa iṣelọpọ pupọ ti hisulini eniyan, igbaradi ni a gba ti o ni akoko ifihan to apapọ.

1. Ojutu naa gba ipa laarin awọn iṣẹju 60, ṣugbọn akoko ti iṣẹ ṣiṣe ti o ga julọ ni a ṣe akiyesi ni wakati mẹfa si meje lẹhin abẹrẹ naa.
2. Oogun naa kuro ni ara patapata lẹhin awọn wakati 12.
3. Iru awọn oogun bẹ pẹlu Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Awọn GMO tun wa ti o ni asiko kukuru ti ifihan si ara. Iwọnyi pẹlu iṣeduro hisulini Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin. Iru awọn insulins yii ni ipo ti n ṣiṣẹ lẹhin wakati meji si mẹta, ati awọn ami akọkọ ti iṣe ti oogun naa ni a le rii laarin idaji wakati kan lẹhin abẹrẹ naa.

Ṣaaju ki o to ṣakoso insulin, awọn GMO nilo lati ṣe ayewo fun akoyawo ati isansa ti awọn nkan ajeji ni omi omi. Ti awọn nkan ajeji, turbidity tabi ojoriro han ninu oogun, a gbọdọ sọ vial naa silẹ - oogun naa ko dara fun lilo.

Hisulini ti o lo gbọdọ wa ni iwọn otutu otutu. Iwọn lilo homonu naa gbọdọ tunṣe ti o ba jẹ pe alarin alakan ba ni arun aiṣan, didi tairodu, aisan Addison, hypopituitarism, ati arun kidinrin onibaje.

Awọn ikọlu ti hypoglycemia ṣee ṣe pẹlu iṣuju ti oogun naa, ni ọran ti igbala si iru insulini tuntun kan, nitori si awọn ounjẹ fifo tabi apọju ti ara. Pẹlupẹlu ẹbi naa le jẹ awọn arun ti o dinku iwulo fun homonu kan - alefa ti o lagbara ti arun kidinrin, arun ẹdọ, idinku ẹjẹ tairodu, kolaginni adrenal, ati ọṣẹ inu pituitary.

1. Wiwọn idinku ninu gaari ẹjẹ ṣee ṣe pẹlu iyipada ni agbegbe abẹrẹ. Nitorinaa, o jẹ dandan lati yipada lati oriṣi insulini kan ni ironu ati pe lẹhin adehun pẹlu alagbawo ti o lọ si.
2. Ti alakan ba lo insulini ni ṣiṣe kukuru, nigbakan iwọn didun ti àsopọ sanra dinku ni aaye abẹrẹ naa,, ni ọna miiran, pọ si. Lati ṣe idi eyi, abẹrẹ naa gbọdọ ṣee ṣe ni awọn aaye oriṣiriṣi.

Awọn obinrin ti o loyun gbọdọ mọ pe awọn ibeere insulini le yatọ nigba awọn akoko oṣu ti o yatọ. Lati ṣe eyi, o nilo lati ṣe idanwo gaari suga ẹjẹ lojoojumọ pẹlu glucometer.

Iṣe ti insulin lori ara eniyan ni a ṣe alaye ni alaye ni fidio ninu nkan yii.

1. Ipilẹ ati awọn iṣẹ ti hisulini 5

1.1. Awọn be ti a npe ni hisulini 5

1,2. Idi pataki ti hisulini ti insulin 7

1.3. Insulin Biosynthesis 8

2. Jiini hisulini isọdi iṣe 10

2,1. Lilo awọn ọna ti ẹrọ jiini fun kolaginni ti awọn oogun 10

2,2. Awọn ọna Imọ-Jiini 11

2,3. Iṣelọpọ hisulini iṣelọpọ 14

Ipari 18

Apọju awọn aami aisan

Nigbati o ba nlo insulin, o ṣe pataki lati tẹle awọn iṣeduro ti dokita ki o ṣe akiyesi iwọn lilo deede ti oogun ti a fun ni.

Ni ọran ti aini-ibamu pẹlu awọn ofin ati apọju, alakan bẹrẹ lati ni awọn efori lile, ijamba, ebi, gbigba, oṣuwọn ọkan, eniyan naa di alainiṣẹ, inu bi. Awọn igbaya ni gbogbo ara ati iwariri tun le ṣe akiyesi.

Iru awọn aami aisan jẹ irufẹ si awọn ami ti idinku ninu glukosi ẹjẹ.Pẹlu ipele kekere ti awọn aami aisan, alakan le yanju iṣoro naa ni ominira ati mu ipo naa dara. Lati ṣe eyi, jẹ candy tabi eyikeyi miiran dun ọja ti o ni gaari.

• Ti coma dayabetiki ba waye, wọn lo ojutu dextrose, a fun oogun naa ni iṣan titi eniyan yoo fi mọ. Ni awọn ami ifura akọkọ, o jẹ dandan lati pe ọkọ alaisan kan, eyiti yoo ni anfani lati mu alaisan naa si laaye nipasẹ awọn ọna pajawiri.
• Gẹgẹbi awọn igbelaruge ẹgbẹ lẹhin lilo awọn GMOs, eniyan ni rashes lori awọ ni ijuwe ti urticaria, awọn ẹya ara ti ara, titẹ ẹjẹ silẹ titan, igara ati kikuru eemi le waye. Eyi jẹ iyọhun-inira si oogun kan, eyiti lẹhin igba diẹ le parẹ lori tirẹ laisi kikọlu iṣoogun. Ti ipo naa ba tẹsiwaju, o yẹ ki o kan si dokita rẹ.
• Ni awọn ọjọ akọkọ ti mu igbaradi insulini, awọn alagbẹ aarun ara wa nigbagbogbo, eniyan ni iriri aini omi, itunra pọ si, wiwu lori awọn apa ati awọn ẹsẹ ti o han, ati isunmi nigbagbogbo. Iru awọn aami aisan bẹẹ maa n lọ lọ yara yara ki o maṣe tun waye.

Awọn agbeyewo ati awọn asọye

Mo ni àtọgbẹ iru 2 - ti ko ni igbẹkẹle-insulin. Ọrẹ kan gba ọ ni isunmọ suga ẹjẹ pẹlu DiabeNot. Mo paṣẹ nipasẹ Intanẹẹti. Bibẹrẹ gbigba naa.

Mo tẹle ounjẹ ti ko muna, ni gbogbo owurọ Mo bẹrẹ lati rin 2-3 ibuso lori ẹsẹ. Ni ọsẹ meji ti o kọja, Mo ṣe akiyesi idinku kekere ninu gaari lori mita ni owurọ ṣaaju ounjẹ owurọ lati 9.3 si 7.1, ati paapaa si 6 lana.

1! Mo tẹsiwaju ọna idiwọ naa. Emi yoo yọkuro kuro nipa awọn aṣeyọri.

Margarita Pavlovna, Mo tun joko lori Diabenot ni bayi. SD 2. Ni otitọ Emi ko ni akoko fun ounjẹ ati rin, ṣugbọn emi ko ṣe ibalofin awọn ohun mimu ati awọn kalori, Mo ro pe XE, ṣugbọn nitori ọjọ-ori, suga tun ga.

Awọn abajade ko dara bi tirẹ, ṣugbọn fun gaari 7.0 ko ni jade fun ọsẹ kan. Kini glucometer wo ni o fiwọn suga pẹlu? Njẹ o fi pilasima han tabi gbogbo ẹjẹ? Mo fẹ ṣe afiwe awọn abajade lati mu oogun naa.

O ṣeun pupọ fun iru ifiweranṣẹ alaye.

Iṣelọpọ hisulini iṣelọpọ

Lati ṣe eniyan ni ilera, o nilo lati ṣe atẹle ipele ti hisulini ninu ara. Homonu yii yẹ ki o to ki glukosi ko ṣajọ ninu ẹjẹ. Bibẹẹkọ, ni ọran ti awọn rudurudu ti iṣelọpọ, dokita ṣe ayẹwo àtọgbẹ.

Itọju ailera fun ipele ilọsiwaju ti àtọgbẹ mellitus ni lati ṣatunto ifọkansi isonu ti insulin, eyiti ko le fun ni nipa ti ara nipasẹ ara. Fun eyi, a lo insulini tiotuka, eyiti o jẹ iru ẹrọ ti o mọ eto ara eniyan. Ti oronro jẹ lodidi fun iṣelọpọ iru homonu kan.

Fun iṣelọpọ hisulini, kii ṣe imọ-ẹrọ nikan fun iṣelọpọ homonu ti ara ni a lo, awọn olupese tun lo insulin ti a gba insulin títúnṣe. Oogun naa ti samisi "solubilis" ni a fihan bi tiotuka.

Awọn oriṣi awọn oogun

Bii tabi insulin biphasic jiini ti ẹda eniyan ni awọn orukọ iṣowo oriṣiriṣi. Paapaa, awọn homonu le yatọ ni akoko iṣe, ọna ti igbaradi ojutu. Awọn ọja ti wa ni oniwa da lori iru hisulini.

Awọn insulini atunse ti ipilẹṣẹ jẹ apakan ti awọn oogun bii Humudar, Vozulim, Actrapid. Insuran, Gensulin. Eyi kii ṣe atokọ pipe ti iru awọn oogun, nọmba wọn tobi pupọ.

Gbogbo awọn oogun ti o loke wa yatọ si ni awọn ofin ti ifihan si ara. Awọn GMO le ṣiṣe ni awọn wakati pupọ tabi le ṣiṣẹ fun gbogbo awọn ọjọ.

Awọn oogun idapọ meji-pẹlu awọn oogun ti o ni awọn ohun elo kan ti o yi akoko ifihan si oogun naa.

• Awọn iru awọn oogun ni a ta ni irisi awọn apopọ, pẹlu awọn homonu ti o gba abinibi.
• Awọn owo wọnyi pẹlu Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
• A lo oogun ni igba meji ọjọ kan, idaji wakati ṣaaju ounjẹ. Iru eto yii yẹ ki o faramọ muna, nitori homonu naa ni ibatan taara si asiko ti o jẹ ounjẹ.

Nipa iṣelọpọ pupọ ti hisulini eniyan, igbaradi ni a gba ti o ni akoko ifihan to apapọ.

1. Ojutu naa gba ipa laarin awọn iṣẹju 60, ṣugbọn akoko ti iṣẹ ṣiṣe ti o ga julọ ni a ṣe akiyesi ni wakati mẹfa si meje lẹhin abẹrẹ naa.
2. Oogun naa kuro ni ara patapata lẹhin awọn wakati 12.
3. Iru awọn oogun bẹ pẹlu Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Awọn GMO tun wa ti o ni asiko kukuru ti ifihan si ara. Iwọnyi pẹlu iṣeduro hisulini Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin. Iru awọn insulins yii ni ipo ti n ṣiṣẹ lẹhin wakati meji si mẹta, ati awọn ami akọkọ ti iṣe ti oogun naa ni a le rii laarin idaji wakati kan lẹhin abẹrẹ naa.

Iru awọn oogun wọnyi ti yọkuro patapata lati ara lẹhin wakati mẹfa.

Lilo isulini insulin ti ara eniyan ti atunse fun àtọgbẹ

Hisulini ti aratuntun eniyan jẹ rirọpo homonu ti o wọpọ fun isulini ti o ṣe iṣọn.

Kii ṣe nikan homonu títúnṣe eniyan homonu ti lo fun kolaginni, ṣugbọn tun ẹda ti a ṣẹda. Aṣayan miiran ti a mọ daradara fun ṣiṣẹda oogun naa ni lilo ti insulin ẹlẹdẹ ti a yipada, nitori

ninu ẹda ati awọn iṣẹ rẹ, o sunmọ eniyan.

Eto iṣelọpọ hisulini jiini.

Awọn itọkasi ati contraindications

Hisulini atilẹba atọwọda le ṣee lo mejeeji fun iru ẹjẹ mellitus 1 ati àtọgbẹ 2, nigbati a ba ṣe akiyesi idurosinsin si awọn oogun roba pẹlu iseda hypoglycemic kan.

O le ṣee lo nigbati alaisan ba wa ninu awọn oriṣi coma kan. Ti obinrin ti o loyun ba n bẹrẹ lati ni itọ alatọ, lẹhinna lilo insulin ẹlẹrọ ni a gba laaye, ṣugbọn nikan ti ounjẹ ko ba ṣe iranlọwọ lori awọn ipele glukosi. Lilo rẹ ni a ṣe iṣeduro ni awọn ọran ti ikolu pẹlu awọn akoran ninu eyiti a le ṣe akiyesi hyperthermia.

Awọn igbaradi Gene jẹ aṣeyọri ninu lilo wọn lakoko ibimọ, awọn iṣẹ, awọn ọgbẹ, awọn ailera iṣọn-ẹjẹ ati ni ọran ti iyipada ayẹyẹ si hisulini pẹlu igbese gigun.

O jẹ ewọ lati lo awọn ipalemo ẹbun rirọpo homonu pẹlu ifunra si awọn eroja ti oogun naa ati pẹlu hypoglycemia.

Igbese ti oogun ti oogun

Awọn oogun ti iru yii fesi pẹlu awọn olugba kan ti awọn membran sẹẹli, dida awọn eka pẹlu wọn. Nigbati o ba wọ inu awọn sẹẹli, eka ti oogun naa ni ipa lori iṣẹ naa, safikun lati ni agbara pupọ ati lati gbe awọn afikun ensaemusi sii.

Ipele glukosi ṣubu nitori otitọ pe o ti ni ilọsiwaju diẹ sii nipasẹ awọn sẹẹli. Lẹhin iyẹn, ilana ti lipogenesis, iṣelọpọ amuaradagba mu iyara ati iyara ti ẹdọ ninu dida glucose dinku.

Iye akoko oogun naa yoo dale lori aaye abẹrẹ, iru oogun, iwọn lilo ati idahun ara ẹni ti ara eniyan. Dokita nikan ni o le ṣeto awọn abere ati ṣe ilana awọn oogun kan ninu ẹgbẹ yii. Ni akoko ibẹrẹ ti mu awọn oogun, alaisan ni abojuto nipasẹ awọn dokita lati rii boya wọn kọ oogun naa.

Apẹẹrẹ ti Awọn oogun Onitọju Ẹmi Eniyan

Hisulini ti a mọtilẹ jiini ti ẹda eniyan wa ninu awọn oogun ti a mọ daradara bi Insuran, Insuman, Vozulim, Penfill, Biosulin, Gensulin, Actrapid, Rinsulin, Humulin, Humudar, Rosinsulin ati diẹ ninu awọn miiran.

Orisirisi hisulini lo wa.Ọkan ninu awọn kilasika ṣe ifiyesi iye akoko oogun naa. Gẹgẹbi rẹ, hisulini tiotuka le ni iṣẹ kukuru ati gigun. Awọn oogun apapọ (hisulini biphasic) wa, eyiti o ni nkan ti iyara ati ṣiṣe ni gigun.

Iru oogun yii ni a pe ni apopọ. Lara wọn, awọn kan wa ti a ṣẹda pẹlu iyipada ninu homonu eniyan. Iṣeduro-ipele meji jẹ Mikstard, Gansulin, Insuman, Humulin ati Gensulin. Wọn nilo lati lo wọn lẹmeji ọjọ kan, idaji wakati kan ṣaaju ounjẹ.

Eyi jẹ nitori otitọ pe insulin-meji alakoso ni nkan ti o ṣe nkan kukuru, gbigbemi eyiti o da lori ounjẹ.

Afọwọkọ ẹrọ ti homonu eniyan wa laarin awọn oogun pẹlu iwọn-iye ti iye akoko. Hisulini tiotuka yii bẹrẹ lati ṣe lẹhin wakati kan, ati pe tente oke iṣẹ rẹ waye lẹhin awọn wakati 7. Lẹhin awọn wakati 12, o ti ṣafihan. Oogun ti ẹda eniyan ti ẹgbẹ yii jẹ Insuman, Protafan, Humulin, Rinsulin, Biosulin, Gensulin, Gansulin, Insuran.

Oogun ti ẹda eniyan wa laarin ẹgbẹ pẹlu iṣẹ kukuru. Fun apẹẹrẹ, iwọnyi pẹlu Gansulin, Insuran, Humulin, Rinsulin, Gensulin, Bioinsulin ati Actrapid. Iru insulini tiotuka ni iṣẹ bẹrẹ ni idaji wakati kan, ati iṣẹ ṣiṣe rẹ de ipele ti o pọju ni awọn wakati meji. Iru awọn oogun bẹ ni o yọ fun wakati 6.

Ni ọran ti iṣojuuju ti awọn oogun pẹlu hisulini atunse ẹrọ, ailera, idaamu, rirẹ, híhù, chi, alekun alekun ti ọfin tutu, iwariri, pallor, palpitations, efori, igigirisẹ ati ebi le waye. Gbogbo awọn wọnyi jẹ aami aiṣan hypoglycemia.

Ti arun yii ṣẹṣẹ bẹrẹ lati dagbasoke ati pe o wa ni iṣaju rẹ, awọn irọrun rọrun, lẹhinna o le yọ gbogbo awọn aami aisan kuro funrararẹ. Lati ṣe eyi, o nilo lati jẹ awọn ounjẹ pẹlu gaari ati giga ni awọn carbohydrates, eyiti a le rọra ni rọọrun. Glucagon ati ojutu dextrose le ṣafihan sinu ara.

Ti eniyan ba ṣubu sinu coma, lẹhinna o nilo lati ara abẹrẹ dextrose ti a tunṣe titi ipo yoo fi ga si.

Diẹ ninu awọn eniyan le dagbasoke awọn nkan ti ara korira si lilo awọn oogun ti a tunmu jiini pẹlu hisulini. Awọn ami aisan le ni awọn hives, wiwu, ipadanu agbara, riru ẹjẹ ti o lọ silẹ, kuru ti ẹmi, suru, iba, ati nyún.

Ni awọn ọrọ miiran, hypoglycemia ati coma waye. Awọn iṣoro pẹlu imọ eniyan ati paapaa coma le waye. Ti alaisan kan ba padanu oogun, lẹhinna o le dagbasoke hyperglycemia.

O han nitori awọn iwọn kekere alakoko, pẹlu idagbasoke ti awọn iyalẹnu akoran ninu ara, ati paapaa ti o ko ba faramọ awọn ofin ti ounjẹ.

Ni awọn ọrọ kan, alaisan naa le dagbasoke lipodystrophy ni awọn ibiti a ti ṣakoso oogun naa.

Ni ibẹrẹ lilo awọn oogun, puffiness, aini omi, idaamu, ati ikogun ikini le waye. Ṣugbọn awọn iyalẹnu wọnyi jẹ igba diẹ.

Lilo ti aropo fun hisulini ti ara, gẹgẹ bi nkan ti o ti wa ohun abinibi, jẹ afikun ti o tayọ si itọju ti awọn atọgbẹ.

O ṣe iranlọwọ lati dinku ipele suga nitori otitọ pe glucose jẹ diẹ sii gba nipasẹ awọn sẹẹli, ati awọn ilana ti iyipada irin-ajo rẹ. Ṣugbọn awọn oogun wọnyi nilo lati ṣee lo ni ibamu si iwe ilana ti dokita, nitori

wọn le fa awọn ipa ilera ti aifẹ fun alaisan.

Kini insulin ṣe lati?

Insulini jẹ oogun akọkọ fun itọju iru àtọgbẹ 1. Nigba miiran o tun nlo lati mu iduroṣinṣin alaisan naa ati imudarasi alafia rẹ ni iru arun keji. Ohun elo yii nipasẹ ẹda rẹ jẹ homonu kan ti o lagbara lati ni ipa iṣelọpọ tairodu ni awọn iwọn kekere.

Ni igbagbogbo, ti oronro ṣe agbejade hisulini to, eyiti o ṣe iranlọwọ lati ṣetọju ipele ti ẹkọ iwulo ẹya-ara ti gaari ẹjẹ. Ṣugbọn pẹlu awọn rudurudu endocrine to ṣe pataki, aye kan ṣoṣo lati ṣe iranlọwọ fun alaisan nigbagbogbo jẹ awọn abẹrẹ insulin deede.

Laanu, ko ṣee ṣe lati mu orally (ni irisi awọn tabulẹti), nitori o ti parẹ patapata ninu tito nkan lẹsẹsẹ o si padanu iye ti ẹkọ.

Awọn igbaradi gba lati awọn ohun elo aise ti ipilẹṣẹ ti ẹranko

Gba homonu yii lati inu awọn elede ati maalu jẹ imọ-ẹrọ atijọ ti o ṣọwọn lo loni.

Eyi jẹ nitori didara kekere ti oogun ti a gba, ifarahan rẹ lati fa awọn aati inira ati alefa ti ko to.

Otitọ ni pe niwon homonu naa jẹ nkan ti amuaradagba, o ni oriṣi eto amino acids kan pato.

Hisulini ti a ṣejade ninu ẹran ẹlẹdẹ ṣe iyatọ ninu idapọ amino acid lati hisulini eniyan nipasẹ amino acid 1, ati iṣeduro bovine nipasẹ 3.

Ni ibẹrẹ ati arin ti orundun 20, nigbati awọn oogun iru ko ba si, paapaa iru isulini jẹ ipinfunni ninu oogun ati gba laaye gbigba itọju ti awọn alatọ si ipele titun. Awọn homonu ti a gba nipasẹ ọna yii dinku suga ẹjẹ, sibẹsibẹ, wọn ma nfa awọn igbelaruge ẹgbẹ ati awọn nkan.

Awọn iyatọ ninu akopọ ti amino acids ati awọn abuku ninu oogun naa ni ipa lori ipo ti awọn alaisan, ni pataki ni awọn ẹka ti o ni ipalara diẹ sii ti awọn alaisan (awọn ọmọde ati awọn agba).

Idi miiran fun ifarada ti ko dara ti iru hisulini yii jẹ niwaju ṣiwaju iṣatunṣe rẹ ninu oogun (proinsulin), eyiti ko ṣee ṣe lati yọ ninu iyatọ iyatọ oogun yii.

Ni ode oni, awọn insulins ẹran ẹlẹdẹ ti o ti ni ilọsiwaju ti ko ni awọn aito kukuru wọnyi. Wọn gba lati inu ẹran ẹlẹdẹ, ṣugbọn lẹhin eyi wọn tẹriba si ṣiṣe afikun ati isọdọmọ. Wọn jẹ multicomponent ati ni awọn aṣeyọri.

Iṣeduro ẹsin ẹlẹdẹ ti a yipada ni iṣe ti ko si yatọ si homonu eniyan, nitorinaa o tun nlo ni iṣe

Iru awọn oogun bẹ gba laaye nipasẹ awọn alaisan ti o dara julọ daradara ati pe wọn ko fa awọn aati buburu, wọn ko ṣe idiwọ eto ajesara ati mu idinku suga ẹjẹ daradara. A ko lo hisulini Bovine ni oogun loni, nitori nitori ọna ajeji rẹ o ni ipa lori odi ati awọn eto miiran ti ara eniyan.

Inulin Ẹya-ara

Hisulini eniyan, eyiti o lo fun awọn alagbẹ, lori iwọn ile-iṣẹ ni a gba ni awọn ọna meji:

Awọn ipo ipamọ fun hisulini

• lilo itọju ensaemusi ti hisulini ẹfin,
• lilo awọn igara ti iyipada ti abinibi ti Escherichia coli tabi iwukara.

Pẹlu iyipada physico-kemikali kan, awọn ohun-ara ti insulin hisulini labẹ iṣẹ ti awọn ensaemusi pataki di aami si hisulini eniyan. Tiwqn amino acid ti igbaradi ti Abajade ko si yatọ si tiwqn homonu adayeba ti o ṣe agbejade ni ara eniyan.

Lakoko ilana iṣelọpọ, oogun naa gba imotara giga, nitorinaa o ko fa awọn aati inira tabi awọn ifihan aiṣedeede miiran.

Ṣugbọn nigbagbogbo julọ, a gba insulin nipa lilo awọn yipada (ipilẹṣẹ Jiini) awọn microorganisms. Lilo awọn ọna imọ-ẹrọ, awọn kokoro arun tabi iwukara ni a yipada ni ọna ti awọn funrara wọn le gbejade hisulini.

Ni afikun si iṣelọpọ insulin funrararẹ, isọdọmọ rẹ ṣe ipa pataki. Ki oogun naa ko fa eyikeyi inira ati awọn aati iredodo, ni ipele kọọkan o jẹ dandan lati ṣe abojuto mimọ ti awọn igara ti awọn microorganisms ati gbogbo awọn solusan, bi awọn eroja ti a lo.

Awọn ọna 2 wa fun iṣelọpọ insulin. Ni igba akọkọ ti wọn da lori lilo awọn oriṣiriṣi oriṣiriṣi meji (eya) ti ẹya microorganism kan.

Ọkọọkan wọn ṣiṣẹda pq kan ṣoṣo ti molikula DNA homonu (meji lo wa ninu wọn, wọn si ni iyipo papọ).

Lẹhinna awọn ẹwọn wọnyi ni asopọ, ati ninu abajade abajade ti o ti ṣee ṣe tẹlẹ lati pàla awọn fọọmu ifilọlẹ ti nṣiṣe lọwọ si awọn ti ko gbe eyikeyi pataki ti ẹkọ.

Ọna keji lati gba oogun ni lilo Escherichia coli tabi iwukara wa da lori otitọ pe microbe akọkọ ṣafihan hisulini aitọ (iyẹn ni, iṣaaju rẹ, proinsulin). Lẹhinna, lilo itọju enzymatic, fọọmu yii mu ṣiṣẹ o si lo ninu oogun.

Oṣiṣẹ ti o ni iraye si awọn ohun elo iṣelọpọ kan yẹ ki o wa ni imura nigbagbogbo ni aṣọ aabo ti o ni abawọn, eyiti o yọkuro olubasọrọ ti oogun naa pẹlu awọn iṣan eegun eniyan.

Gbogbo awọn ilana wọnyi nigbagbogbo jẹ adaṣe, afẹfẹ ati gbogbo awọn roboto ni olubasọrọ pẹlu ampoules ati awọn lẹgbẹ jẹ aiṣan, ati awọn ila pẹlu ẹrọ ti wa ni edidi hermetically.

Awọn ọna imọ-ẹrọ imọ-jinlẹ jẹ ki awọn onimo ijinlẹ sayensi le ronu nipa awọn ọna yiyan miiran si alakan.

Fun apẹẹrẹ, titi di oni, awọn ijinlẹ deede ti iṣelọpọ ti awọn sẹẹli beta ti ẹgan apọn ti wa ni ṣiṣe, eyiti o le gba nipa lilo awọn ọna ẹrọ jiini.

Boya ni ọjọ iwaju wọn yoo lo lati ṣe imudarasi iṣẹ-ara yii ni eniyan aisan.

Ṣiṣẹjade awọn igbaradi isulẹ ti ode oni jẹ ilana imọ-ẹrọ ti o nipọn ti o ni adaṣe adaṣe ati idaran lọwọ eniyan

Awọn afikun awọn ẹya

Ṣiṣẹ iṣelọpọ insulin laisi awọn aṣawọri ni agbaye ode oni o fẹrẹ ṣee ṣe lati fojuinu, nitori wọn le mu awọn ohun-ini kemikali rẹ pọ si, fa akoko igbese ṣiṣẹ ati ṣaṣeyọri giga giga ti mimọ.

Nipa awọn ohun-ini wọn, gbogbo awọn eroja afikun ni a le pin si awọn kilasi atẹle:

• awọn onigbọwọ (awọn nkan ti a lo lati pese akoko gigun ti igbese ti oogun),
• awọn nkan elo alatako
• Awọn amuduro, nitori eyiti a ṣe itọju acid aipe ni ojutu oogun naa.

Awọn afikun Awọn afikun

Awọn insulins ti n ṣiṣẹ ṣiṣe gigun ti iṣẹ ṣiṣe ti aye wa fun wakati 8 si 42 (da lori ẹgbẹ ti oogun naa). Ipa yii ni aṣeyọri nitori afikun ti awọn nkan pataki - awọn gigun gigun si abẹrẹ abẹrẹ. Nigbagbogbo, ọkan ninu awọn iṣiro wọnyi ni a lo fun idi eyi:

Awọn ọlọjẹ ti o mu iṣẹ ṣiṣe ti oogun naa pẹ ni alaye isọdọmọ ati pe o jẹ ohun-ara korira (fun apẹẹrẹ, protamini). Awọn iyọ zinc tun ko ni ipa ni ipa boya awọn iṣe iṣe insulin tabi alafia eniyan.

Awọn ajẹsara ninu idapọ ti hisulini jẹ pataki ki makiro makirowefu ma ṣe isodipupo lakoko ibi ipamọ ati lilo ninu rẹ. Awọn nkan wọnyi jẹ awọn ohun itọju ati rii daju titọju awọn iṣẹ iṣe ti oogun naa.

Ni afikun, ti alaisan ba ṣakoso homonu naa lati vial kan nikan si ara rẹ, lẹhinna oogun naa le ṣiṣe ni fun awọn ọjọ pupọ.

Nitori awọn ohun elo antibacterial ti o ni agbara to gaju, on kii yoo nilo lati jabọ oogun ti ko lo nitori agbara ẹkọ ti ẹda ni ojutu kan ti awọn microbes.

Awọn nkan wọnyi ni a le lo bi awọn alamọ-jijẹ ni iṣelọpọ hisulini:

Ti ojutu naa ba ni awọn ion zinc, wọn tun ṣe bi itọju afikun nitori awọn ohun-ini apakokoro wọn

Fun iṣelọpọ ti iru insulini kọọkan, awọn paati alami-ara jẹ dara. Ijọṣepọ wọn pẹlu homonu gbọdọ ni iwadii ni ipele ti awọn idanwo deede, nitori pe olutọju ko gbọdọ ṣe idiwọ iṣẹ iṣe ti insulin tabi bibẹẹkọ ni ipa awọn ohun-ini rẹ.

Lilo awọn ohun itọju ni awọn ọran pupọ gba laaye laaye lati ṣakoso homonu labẹ awọ ara laisi itọju iṣaaju pẹlu oti tabi awọn apakokoro miiran (olupese ti n tọka si eyi ninu awọn itọnisọna).

Eyi ṣe dẹrọ iṣakoso ti oogun ati dinku nọmba awọn ifọwọyi igbaradi ṣaaju ki abẹrẹ funrararẹ.

Ṣugbọn iṣeduro yii ṣiṣẹ nikan ti a ba nṣakoso ojutu nipa lilo syringe insirin pẹlu onirin tinrin kan.

Awọn iduroṣinṣin

Awọn iduroṣinṣin jẹ pataki ki pH ti ojutu wa ni itọju ni ipele ti a fun. Itoju oogun naa, iṣẹ rẹ ati iduroṣinṣin ti awọn ohun-ini kemikali dale ipele ti acid. Ninu iṣelọpọ homonu abẹrẹ fun awọn alaisan pẹlu àtọgbẹ, awọn phosphates ni a maa n lo fun idi eyi.

Fun insulini pẹlu sinkii, awọn iduroṣinṣin ojutu ko nilo nigbagbogbo, nitori awọn ions irin ṣe iranlọwọ lati ṣetọju iwọntunwọnsi to wulo.

Ti wọn ba lo wọn, lẹhinna wọn lo awọn agbo ogun kemikali miiran dipo awọn irawọ owurọ, nitori apapọ awọn nkan wọnyi n yori si ojoriro ati aiṣe ti oogun naa.

Ohun-ini pataki ti a fihan si gbogbo awọn iduroṣinṣin jẹ ailewu ati ailagbara lati tẹ awọn ifura eyikeyi pẹlu hisulini.

Onkọwe alamọdaju endocrinologist yẹ ki o wo pẹlu yiyan awọn oogun injectable fun àtọgbẹ fun alaisan kọọkan kọọkan.

Iṣẹ ti insulin kii ṣe nikan lati ṣetọju ipele deede gaari ninu ẹjẹ, ṣugbọn kii ṣe lati ṣe ipalara awọn ara ati awọn eto miiran. Oogun naa yẹ ki o wa ni didoju-ara, jẹ nkan-ara korira ati paapaa ti ifarada.

O tun rọrun pupọ ti o ba jẹ pe hisulini ti a ti yan le darapọ pẹlu awọn ẹya miiran ni ibamu si akoko iṣe.

Gba insulin, awọn ọna ti ina-jiini, Imọ-ẹrọ Imọ-ọna - Iṣẹ iṣe

1. Ipilẹ ati awọn iṣẹ ti hisulini 5

1.1. Awọn be ti a npe ni hisulini 5

1,2. Idi pataki ti hisulini ti insulin 7

1.3. Insulin Biosynthesis 8

2. Jiini hisulini isọdi iṣe 10

2,1. Lilo awọn ọna ti ẹrọ jiini fun kolaginni ti awọn oogun 10

2,2. Awọn ọna Imọ-Jiini 11

2,3. Iṣelọpọ hisulini iṣelọpọ 14