Ọna ipinnu glukosi oxidase

Awọn opo ti ọna. Ọna naa da lori iyasọtọ ti iṣẹ ti glukosi oxidase henensiamu. Enzymu yii ṣe iṣuu glukosi ni iwaju atẹgun molikula lati ṣe agbejade gluconolactone, eyiti o jẹ lẹẹkọkan hydrolyzes si gluconic acid. Glukosi oxidase oxidizes glukosi lati ṣe agbekalẹ hydrogen peroxide (H₂Ah₂), eyiti o ṣe atunṣe pẹlu 4-aminoantipyrine ati phenol labẹ iṣe ti peroxidase. Gẹgẹbi abajade, a ṣẹda okun awọ awọ awọ kan ti iwuwo opitika ni 510 nm jẹ ibamu si ifọkansi ti glukosi ninu ayẹwo naa.

glukosi + O₂ + H₂Ah Acid gluconic acid + H₂Ah₂

2 N₂Ah₂ + 4-aminoantipyrine + phenol → quinonymine + 4H₂Ah

Ohun elo CPK, centrifuge, thermostat, awọn agbele, awọn iwẹ idanwo, pipettes, ohun elo ti ibi, awọn atunlo ti o wa ninu ojutu iṣẹ.

ayẹwo adanwo, milimita

apewọn apẹẹrẹ, milimita

Idanwo airi (N₂O), milimita

Oyan alimọn glukosi (itọkasi)

Awọn Falopiani ti wa ni abe ni igbona kan ni 37 ° C fun iṣẹju 15, lẹhinna ṣe awọ lori CPC pẹlu àlẹmọ alawọ ni awọn aṣọ wiwọ pẹlu sisanra fẹlẹfẹlẹ kan ti 5 mm lodi si ayẹwo ti o ṣofo (N₂O). Awọ awọ jẹ idurosinsin fun wakati 1 lẹhin abeabo.

Iṣiro Ti pese akoonu glukosi nipasẹ agbekalẹ:

C =x C boṣewa nibo

C jẹ akoonu glukosi ninu apẹẹrẹ esiperimenta, mol / l,

Eop - Agbara iwuwo ti awọn ayẹwo,

Jẹ - iwuwo opitika ti ayẹwo isamisi ẹrọ,

Iwọnwọn C - akoonu ti o wa ninu ojutu isamisi odi, mol / l.

Awọn iwuwọn deede:  ọmọ tuntun - 2.8-4.4 mmol / l

Ọmọ - 3.9 -5,8 mmol / l

Agbalagba - 3.9 - 6,2 mmol / l

Hypoglycemia (GHC).Alekun ninu glukosi ẹjẹ jẹ nitori ọpọlọpọ awọn idi, ni ibamu si eyiti awọn ẹgbẹ meji ti hyperglycemia ṣe iyatọ.

1. Insular - ni nkan ṣe pẹlu insulini ti ko to ninu ara tabi nitori ailagbara ti iṣe.

2. Afikun ohun elo (extrarainlar) - maṣe da lori ipa ti hisulini.

Awọn ilana atẹle ni o ṣe pataki pupọ ninu dida awọn HHCs: fifọ glycogen, pọsi neoglucogenesis, idiwọ ti iṣọn glycogen, lilo iṣọn glukosi ti iṣan labẹ ipa ti awọn antagonists homonu: somatotropin, glucorticoids, thyroxine, thyrotropin.

A ṣe akiyesi hyperglycemia Alimentary pẹlu gbigbemi pupọ ti glukosi ninu ẹjẹ (fun apẹẹrẹ, hyperglycemia pẹlu fifuye suga). “Ẹdọ-ẹdọ oniba” heperimentia jẹ waye ninu awọn egbo ẹdọfa.

Alagbara ati ailagbara onibaje nigbagbogbo pupọ darapọ mọ àtọgbẹ. O jẹ aṣa lati ya sọtọ mellitus àtọgbẹ-insulin ati awọn àtọgbẹ ti o gbẹkẹle mellitus, tabi, lẹsẹsẹ, oriṣi àtọgbẹ Emi ati mellitus II. Ibiyi ni iru ti àtọgbẹ Mo ni asopọ ni akọkọ pẹlu iṣelọpọ iṣan ati iṣelọpọ ti hisulini.

Ẹgbẹ keji ti hyperglycemia ti ni nkan ṣe pẹlu nipataki pẹlu hyperfunction ti awọn keekeke ti endocrine ti n gbe awọn homonu - awọn antagonists insulin. O ṣe akiyesi ni awọn arun bii aisan Hisenko-Cushing ati aisan, acromegaly, thyrotoxicosis, pheochromocytoma, glucoganoma. Awọn ipele glukosi ẹjẹ npọ si pẹlu awọn aarun ẹdọ kan (ni pataki, ni 10-30% ti awọn alaisan ti o ni ẹdọ cirrhosis), hemochromatosis (ẹdọ awọ ti iṣan, iṣọn idẹ).

Hypoglycemia (GPG) - idinku ninu glukosi ẹjẹ - julọ nigbagbogbo ni nkan ṣe pẹlu ilosoke tabi alekun ibatan ninu awọn ipele hisulini ninu ẹjẹ. A ṣe akiyesi hypoglycemia extrapancreatic bi abajade ti aisedeede laarin iwuwo ti awọn ilana ti glycogenolysis ati glyconeogenesis ninu ẹdọ ninu akọn-ọkan ati onibaje onibaje, cirrhosis, eegun ati ẹdọfu dystrophy, oti mimu, majele pẹlu arsenic, irawọ owurọ, ẹdọ toto, . Iyokuro ninu ifọkansi glukosi ẹjẹ nigbagbogbo ni a ṣe akiyesi ni awọn alaisan ti o jiya lati akàn ti esophagus ati awọn eegun eegun ti iṣan ti iṣan ti iṣan (fibroma, fibrosarcoma, neuroma), bi daradara pẹlu eebi eebi ti ko niiṣe, ororo, àtọgbẹ ẹdọ ẹdọ, uremia, ibajẹ lactation ati glucosuria ninu awọn aboyun.

Hypoglycemia le jẹ ti orisun aringbungbun nitori ọpọlọ ọpọlọ, iṣọn-ẹjẹ, ẹjẹ inu ẹjẹ, subarachnoid, iṣọn ọpọlọ.

1. Awọn rudurudu ti a jogun ti tito nkan lẹsẹsẹ ti awọn carbohydrates.

Awọn oriṣi hyperglucoseemia wo ni a mọ si ọ?

3. Kini awọn okunfa ti hyperglucoseemia aisan?

4. Kini o fa ti mellitus àtọgbẹ-igbẹgbẹ tairodu?

5. Kini awọn okunfa biokemika ti awọn arun ajogun: a) glycogenosis? b) aglycogenosis? c) fructosemia? d) galactosemia?

6. Kini awọn ayipada biokemika ti iṣelọpọ agbara nigba iyọwẹwẹ?

7. Ofin ti ọna fun ipinnu ipinnu ifarada glukosi.

Nigbawo ni ọna glucose oxidase ti paṣẹ?

A lo idanwo yii lati rii ifarada suga ti ko ni ailera ati idagbasoke ti aarun suga, ati ni giga arun naa. Ṣugbọn fun iru awọn idi, itupalẹ ko lo igba diẹ, eyi jẹ nitori idiyele giga ati ireti pipẹ ti abajade kan. Nigbagbogbo, ipinnu ti glukosi ninu ẹjẹ ati ito ni lilo ọna yii ni a lo ninu iyatọ iyatọ ti awọn aisan bii:

Suga ti dinku lesekese! Àtọgbẹ lori akoko le ja si opo kan ti awọn arun, gẹgẹ bi awọn iṣoro iran, awọ ati awọn ipo irun, ọgbẹ, gangrene ati paapaa awọn akàn alagbẹ! Awọn eniyan kọ iriri kikoro lati ṣe deede awọn ipele suga wọn. ka lori.

• ailera lactose
• inu-ara
• yomijade ti fructose pẹlu awọn iṣan ara,
• pọ si pentose ninu ito.

Anfani ti ko ni idaniloju ti idanwo glukosi oxidase ni deede.

Kini ipilẹ ti ọna yii?

Awọn ọna oriṣiriṣi lo wa fun ipinnu ipinya ti glukosi ninu ẹjẹ, ṣugbọn glucose oxidase jẹ deede julọ. O da lori otitọ pe lakoko ibaraenisepo gaari pẹlu atẹgun ti oyi oju aye, reagent jẹ oxidized. Hydrogen peroxide ti wa ni idasilẹ sinu ojutu. Ohun elo yii ṣe ajọṣepọ pẹlu orthotoluidine lati fẹlẹfẹlẹ kan ti awọ. Fun ihuwasi ti ifura yii, wiwa ti awọn ensaemusi pataki jẹ pataki. Lakoko ti ifoyina ṣe, glucose oxidase gbọdọ wa, ati nigbati o ba di omi, peroxidase gbọdọ wa. Agbara awọ ti ojutu yoo dale lori akoonu glukosi yoo jẹ kikankikan pupọ si akoonu giga rẹ.

Alaye pataki ti ipinnu glucose oxidase

Iṣiro ti abajade waye nipa lilo titoye ọna ti photometry lẹhin akoko kanna. O jẹ dandan lati lo ipinnu isamisi idiwọn kan ti o ni iwuwasi gaari ti a sọ tẹlẹ ati, bẹrẹ lati ọdọ rẹ, o le ṣe idajọ ifọkansi ti glukosi ninu awọn iṣan ara, nigbagbogbo ninu ẹjẹ.

Bawo ni a ṣe gbe igbekale naa?

O gba ohun elo lati ọdọ alaisan lori ikun ti o ṣofo. Fun idanwo naa, a lo ẹjẹ venous ninu iye 5 milimita. Ni ọjọ alẹ ti iwadii, a fihan alaisan naa ounjẹ ti o muna. Eyi yoo jẹ ki o ṣee ṣe lati ṣe idajọ igbẹkẹle ti abajade ki o yọkuro awọn aṣiṣe itupalẹ ti o ṣeeṣe. Awọn ọjọ 2 ṣaaju gbigba ẹjẹ, alaisan yẹ ki o kọ awọn iwa buburu ti mimu ọti ati mimu siga. O tun jẹ dandan lati fi opin gbigbemi ti awọn ounjẹ ti o ni apọju ati yago fun awọn ipo aapọn nigbakugba ti o ba ṣeeṣe

Lati gba pilasima pẹlu gaari, o jẹ eefa.

Ni igbagbogbo, ọna yii fun ipinnu fojusi glukosi ni a ṣe nipasẹ centrifugation, eyiti awọn eroja fọọmu jẹ sọtọ. Iye gaari ti pinnu tẹlẹ ni pilasima. Nigbati gbogbo awọn atunlo pataki ti o ṣe afikun si rẹ, a ṣe akiyesi awọ lẹhin iṣẹju 20 ti o ba ṣe idanwo naa ni iwọn otutu yara. Iṣiro glukosi ni a ṣe ni ibamu si iṣeto eto isamisi tabi lilo ofin awọn iṣẹ.

Awọn atunnkanka Iwadi

Lati pinnu suga, o rọrun julọ lati lo awọn ọna kiakia fun ipinnu ipinnu glukosi ninu ẹjẹ. Eyi jẹ nitori irọrun ti lilo ati awọn abajade iyara. Ni afikun, alaisan ko nilo lati lọ si yàrá-iwosan tabi ile-iwosan. Ṣugbọn ko dabi idanwo glukosi ti glucose, iru ayẹwo jẹ eyiti ko gbẹkẹle. Niwọn bi ko ti ṣe iyatọ glukosi lati awọn sugars miiran ati ipinnu ipinnu fojusi wọn.

Ipilẹ ti ifun glucose oxidase jẹ iṣuu soda kiloraidi 9% ati iyọ zinc 50%. Wọn ti wa ni afikun ni ipele ti iṣipopada ẹjẹ. Ni afikun, ojutu ajekii pẹlu acetic acid ati iṣuu soda jẹ lilo. Ọna titration pinnu pH rẹ ni 4.8. Lẹhin iyẹn, a ti fi glucose oxidase kun, nitori eyiti hydrogen peroxide ati peroxidase ni a tu silẹ, eyiti o ṣe alabapin si idoti ojutu si fojusi ti o fẹ lati gba esi deede.

Norms ninu itupalẹ

Iwọn gaari ni o mu ni awọn sipo pataki - millimoles fun lita ti ojutu.

Idanwo ẹjẹ glukosi ẹjẹ ẹjẹ jẹ aṣẹ lori ikun ti o ṣofo ki o lo pilasima tabi omi ara fun eyi. Ilana ti opoiye rẹ fun awọn agbalagba fun awọn obinrin ati awọn ọkunrin jẹ 3.3-5.5. Fun awọn ọmọde ti o wa labẹ ọdun 15, nọmba yii kere si ati awọn sakani lati 3.2-5.3. Ninu ọmọ tuntun, glukosi ẹjẹ jẹ 1.7-4.2. Ifihan ilosoke ninu awọn olufihan ni a ṣe akiyesi pẹlu idagbasoke ti alaisan kan pẹlu mellitus àtọgbẹ tabi pẹlu ifarada gluu. Ipo yii jẹ aarun alakan, ati ti a ba fi silẹ ni akoko, o pẹ yoo yori si idagbasoke ti ẹkọ-aisan alapọ-aisan yii.

Ṣe o tun dabi ẹni pe ko ṣee ṣe lati ṣe arogbẹ àtọgbẹ?

Idajọ nipasẹ otitọ pe o n ka awọn ila wọnyi ni bayi, iṣẹgun ni ija lodi si suga suga to ga ni ko wa ni ẹgbẹ rẹ sibẹsibẹ.

Ati pe o ti ronu tẹlẹ nipa itọju ile-iwosan? O jẹ oye, nitori àtọgbẹ jẹ arun ti o lewu pupọ, eyiti, ti a ko ba tọju, le fa iku. Omi kikorò, ito iyara, iran didan. Gbogbo awọn aami aisan wọnyi jẹ faramọ si o ni akọkọ.

Ṣugbọn o ṣee ṣe lati ṣe itọju okunfa dipo ipa naa? A ṣeduro kika kika nkan lori awọn itọju atọka lọwọlọwọ. Ka nkan naa >>